[發明專利]一種快速測定方法

無效

• 申請號: 201110401670.0
• 申請日: 2011-12-05
• 公開（公告）號: CN103134760A
• 公開（公告）日: 2013-06-05
• 發明（設計）人: 蔣朝輝;雷軍;酈敖蘭
• 申請（專利權）人: 江蘇華鋒工具有限公司
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33;G01N1/28
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及糧食精深加工領域，特指一種稻麥加工副產物米糠、麥胚中脂肪氧化酶活力的快速檢測方法，可廣泛應用于糧食加工企業、倉儲企業及糧油檢測機構的品質檢驗與控制。

背景技術

目前，脂肪氧化酶活力測定方法主要有紫外分光光度法、氧電極法等，其中紫外分光光度法應用比較普遍。分光光度法測定的是酶催化反應的初期產物，脂肪氧化酶催化底物亞油酸反應生成的初期產物具有共軛二烯的結構，通過測定反應體系在234nm處的吸光度可以定量生成的共軛二烯量，并推算出酶活力。

底物溶液的透明是利用分光光度法精確測定脂肪氧化酶活性的一個重要前提，反應緩沖體系pH則是影響測定準確度的關鍵因素。已有的研究表明，原料類型、反應溫度、底物濃度、吐溫濃度及反應緩沖體系pH等多種因素均會對脂肪氧化酶活力測定結果準確性產生影響。

迄今，國內在米糠脂肪氧化酶相關研究中，其酶活力測定方法均參照其它植物原料中脂肪氧化酶的分析方法，未見米糠中脂肪氧化酶專門分析方法的相關研究報道。

發明內容

本發明解決其技術問題所采用的技術方案是：一種快速測定方法，首先將米糠進行部分脫脂，然后以緩沖溶液浸提經部分脫脂米糠中的脂肪氧化酶，將該酶提取溶液加入到預先配置的“磷酸鹽-亞油酸-吐溫20”底物溶液中，在234nm、25℃下5min內測定吸光光度值的變化，同時，測定酶提取液中蛋白含量，即可求得米糠中脂肪氧化酶的活力。

本發明，首先采用弱極性有機溶劑對測試樣品進行部分脫脂，同時，對米糠脂肪氧化酶能起到激活作用，有效提高米糠脂肪氧化酶的檢出限；本發明中采用“無水乙醇-亞油酸-吐溫20”體系，簡單快速獲得了透明的底物溶液；有效消除粗酶液的測量誤差，省去了粗酶液純化的繁雜步驟；保證了底物的相對穩定與測定結果的準確性。

具體實施方式

一種快速測定方法，首先將米糠進行部分脫脂，然后以緩沖溶液浸提經部分脫脂米糠中的脂肪氧化酶，將該酶提取溶液加入到預先配置的“磷酸鹽-亞油酸-吐溫20”底物溶液中，在234nm、25℃下5min內測定吸光光度值的變化，同時，測定酶提取液中蛋白含量，即可求得米糠中脂肪氧化酶的活力。