[發明專利]一種蛋白質芯片及制作方法無效
| 申請號: | 201110400303.9 | 申請日: | 2011-12-06 |
| 公開(公告)號: | CN103149364A | 公開(公告)日: | 2013-06-12 |
| 發明(設計)人: | 李洪波 | 申請(專利權)人: | 貴州金玖生物技術有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/68 | 分類號: | G01N33/68 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 550002 貴州省貴陽市*** | 國省代碼: | 貴州;52 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 蛋白質 芯片 制作方法 | ||
技術領域
本發明涉及一種蛋白質芯片及制作方法,屬于生物芯片領域。
技術背景
蛋白質芯片是一種高通量的蛋白功能分析技術,可用于蛋白質表達譜分析,研究蛋白質與蛋白質的相互作用,甚至DNA-蛋白質、RNA-蛋白質的相互作用,篩選藥物作用的蛋白靶點等。他具有高通量、高靈敏度、微型化和自動化等優點。
目前,蛋白質芯片技術大量運用于醫學、科研等等領域。但是,芯片上捕獲分子與基片結合不牢固,易脫落;捕獲分子活性易因長時間保存而降低等問題極大地造成使用用成本提高等問題。
發明內容
本發明的目的在于,克服捕獲分子易脫落的問題,極大地延長捕獲分子活性的保持期限,降低蛋白質芯片的使用成本。
本發明的目的是這樣實現的:
本發明提供的蛋白質芯片,包括固體基片、緩沖層和捕獲分子層。
其中所述的固體基片為玻片。
其中所述的緩沖層為氧化纖維素膜層,該膜層能有效的吸附于固定基片上,并能夠穩固地與捕獲分子結合。
其中所述的捕獲分子層可以為一種或幾種抗體。
本發明提供的蛋白質芯片制作方法包括以下步驟:
1、固體基片的處理
選擇所需大小的玻片,用洗潔精洗凈,去離子水沖洗干凈,風干。將質量比為30%的過氧化氫與98%的硫酸按體積比1~1.5∶4混合,制得混合液。把風干后的玻片放入混合液中浸泡30~60min,去離子水沖洗干凈。
2、緩沖層的制備
將氧化纖維素經可控氧化處理后,以純凈水混溶制備成溶液。將步驟1處理好的玻片浸入到溶液中,常溫浸泡60~120min,即可得到緩沖層。
3、捕獲分子層的制備
將步驟2處理好的玻片一面或全部浸入到所需的一種抗體或幾種抗體混合液中。浸泡時間依賴于混合液濃度。濃度越高,時間越短,可得到本發明所述的蛋白質芯片。
本發明提供的蛋白質芯片可用于醫學或科學研究。
本發明提供的蛋白質芯片制備材料易得,捕獲分子可長時間保持活性,成本低。
實施實例
制備捕獲分子為人免疫球蛋白G的蛋白質芯片,其步驟如下:
(1)固體基片的處理
選擇一塊實驗用玻片,用洗潔精洗凈,去離子水沖洗干凈,風干。將質量比為30%的過氧化氫與98%的硫酸按體積比1~1.5∶4混合,制得混合液。把風干后的玻片放入混合液中浸泡30~60min,去離子水沖洗干凈。
(2)緩沖層的制備
取5g氧化纖維素置入100ml?25%NAOH溶液中,常溫常壓反應8小時。純化水漂洗,甩干,重復3次。加入純凈水混溶制成溶液。將步驟1處理好的玻片浸入到溶液中,常溫浸泡60min,可得到緩沖層。
(3)捕獲分子層的制備
將步驟(2)處理好的玻片全部浸入到2mg/ml的人免疫球蛋白G中浸泡20min。取出用去離子水沖洗干凈,可得捕獲分子為人免疫球蛋白G的蛋白質芯片。
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