[發明專利]胰島素模擬肽融合蛋白和突變體及其應用

有效

• 申請號: 201110399725.9
• 申請日: 2011-11-30
• 公開（公告）號: CN102516393B
• 公開（公告）日: 2017-03-15
• 發明（設計）人: 朱曉東;張海濤;張輝
• 申請（專利權）人: 北京康明百奧新藥研發有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;A61K38/28;A61K47/68;A61K48/00;A61P3/10
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙)11371
• 代理人: 吳開磊

1.一種融合蛋白，由胰島素模擬肽通過連接肽(Linker)與IgG-Fc或IgG-Fc突變體形成，其通式為IMP(Insulin?mimetic?peptides)-Linker-IgG-Fc或者IgG-Fc-Linker-IMP(Insulin?mimetic?peptides)。

2.權利要求1所述IMP為胰島素模擬肽及其突變體(SEQ?ID?NO：1)。

3.權利要求1所述Linker選自序列SEQ?ID?NO：2；SEQ?ID?NO：3；SEQ?ID?NO：4；SEQ?ID?NO：5；SEQ?ID?NO：6；或SEQ?ID?NO：7，(GGGGS)n，其中n為1，2，3，4，5或6。

4.權利要求1所述Linker可以選自SEQ?ID?NO：8，其中n為1，2，3，4，5或6，或者直接連接，或者為其它甘氨酸富集的連接肽。

5.權利要求1所述IgG?Fc(鉸鏈區-CH2-CH3)序列為人IgG1、IgG2、IgG3或IgG4的Fc及其突變或缺失體，上述序列選自SEQ?ID?NO：9；SEQ?ID?NO：10；SEQ?ID?NO：11或SEQ?ID?NO：12，或者選自上述IgG-Fc序列的雜合體，其中IgG-Fc序列參照EU(Kabat)指數進行編號，重要的是上述IgG-Fc突變體選自序列SEQ?ID?NO：13；SEQ?ID?NO：14；SEQ?ID?NO：15；SEQ?ID?NO：16，上述突變位點可以是單位點突變或多位點突變組合，其中：

Xaa₁＝Gln或Thr

Xaa₂＝Gln或Thr

Xaa₃＝Leu，Met或His

Xaa₄＝Ala或Asn

6.根據權利要求1所述，更進一步，與胰島素模擬肽(IMP)相連的融合蛋白可以選自人血白蛋白或轉鐵蛋白，也可以選自人血白蛋白或轉鐵蛋白部分片段、突變體和缺失體。

7.權利要求1～5所述融合蛋白應用于人I型和II型糖尿病的預防與治療，或者其DNA序列應用于基因治療。

8.權利要求5所述融合蛋白突變體，是基于增加與FcRn的親和力來進一步增加IMP在體內的半衰期。

9.權利要求1～5所述融合蛋白使用真核細胞進行表達，蛋白純化過程中使用A或G蛋白葡聚糖凝膠層析柱。

10.權利要求1～5所述融合蛋白使用原核細胞進行表達。