[發明專利]一種灰樹花多糖ZZK組分及其制備方法

有效

• 申請號: 201110398991.X
• 申請日: 2011-11-30
• 公開（公告）號: CN102408494A
• 公開（公告）日: 2012-04-11
• 發明（設計）人: 毛延卿;楊勇杰;張萍;鄭寶芬;楊小麗
• 申請（專利權）人: 杭州眾芝康菇生物技術有限公司
• 主分類號: C08B37/02
• 分類號: C08B37/02;A61K31/736;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

(一)技術領域

本發明涉及一種灰樹花多糖ZZK組分及其制備方法。對灰樹花子實體進行粉碎，提取等步驟得到一種灰樹花多糖ZZK組分，該多糖主要由葡萄糖和甘露糖組成，可用于制作食品添加劑，各種藥物制劑。本發明屬于食品加工，醫藥工業相關領域。

(二)背景技術

自20世紀80年代始，國內外學者對灰樹花多糖進行了大量研究，從灰樹花子實體和菌絲體中提取了幾十種活性多糖，其中包括D-組分、MD組分、Grifolan組分、T-2組分等具有顯著生理活性的組分。這些組分的共同特征就是由β-1，3連接和β-1，6連接的葡萄糖組成，并含有一定量的蛋白質。

Nanba等從灰樹花中提取到的純化灰樹花多糖D-組分和MD-組分是成功的典范。D-組分為灰樹花子實體的酸不溶、堿溶性熱水提取物，相對分子質量約為1.4×10⁶，是一種由高度分化的β-1，3連接為主鏈和β-1，6為支鏈的蛋白聚糖，蛋白含量約為30％，提取率約為0.4％，D-組分進一步分離可以得到E、F等組分。MD-組分相對分子質量約為1×10⁶，蛋白含量小于20％，來自于灰樹花子實體或菌絲體，是在改進D-組分提取工藝基礎上進一步純化的產物，與D-組分具有相同的β-葡聚糖結構。MT-2組分即E-組分，也是一種酸不溶性、堿溶性多糖，是MT-1即D-組分經Sepharose?CL-4B柱和DEAE-Sepharose?CL-6B柱進一步純化后的產物，相對分子質量約為2×10⁶，蛋白含量0.6％，提取率約為0.014％，為含β-1，3支鏈的β-1，6葡聚糖。Kubo等在進行灰樹花子實體多糖分離過程中，發現熱水提取物中加入一倍量乙醇后產生了懸浮物，離心分離后得到一種糖蛋白，即X-組份(糖∶蛋白＝65∶35)，相對分子質量5×10⁵。結構分析表明，X-組份為具有α-1，4分支的β-1，6葡聚糖，口服給藥時具有顯著的降血糖活性。

勞華均等(上海農業學報，1997，13，(1)：25～30)從灰樹花子實體中提取得到灰樹花粗多糖GFP，實驗證明該粗多糖對于小鼠Lewis肺癌和Colon癌均有顯著的抑制作用。喬彥茹等(食用菌學報，2010，17(4)：48～51)從灰樹花子實體中提取得到一種灰樹花多糖GFP75-2-2B，該多糖由巖藻糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖組成，其摩爾比為1.0∶1.3∶3.6∶4.0∶4.5，重均分子量小于8000道爾頓，該多糖具有明顯刺激巨噬細胞分泌NO的活性，NO的分泌能夠增強巨噬細胞對病原微生物、腫瘤細胞等有害物質的作用，是巨噬細胞活化的主要特征之一。Feng?jie-cui等從灰樹花中提取出來一種多糖蛋白(Toxicology?in?vitro?21，2007，417～427)，該多糖由α連接的葡萄糖、半乳糖為主鏈，支鏈由阿拉伯糖組成，蛋白含量約16％，重均分子量21KD。該多糖可以抑制SGC-7901細胞的增長，具有一定的抗腫瘤活性。李小定等從灰樹花子實體中提取得到四個多糖組分PGF1～4(華中農業大學學報，2002年4月21卷第2期186～188)，對PGF1進行成分分析，結果表明PGF1是一種β葡聚糖，該多糖重均分子量11萬道爾頓，單糖組成為葡萄糖，含有1.1％的蛋白質。作者未對PGF1多糖做進一步的純化得到純品多糖并進行結構分析。

目前國內外學者對灰樹花多糖的研究還處于一個起步階段，通過對灰樹花粗多糖的分離得到各種組分如D組分等，這些組分實質上仍然屬于灰樹花粗多糖。比如D組分還可以進一步純化為MD、E或F組分。沒有確定灰樹花多糖的確切有效單體成分及確切結構。這大大阻礙了灰樹花多糖做為藥品尤其是注射劑類藥品的開發。目前國內已經上市的多糖類藥品如注射用香菇多糖就具有明確化學結構，有明確的重均分子量范圍。

2002年浙江方格藥業有限公司第一個在國內獲得灰樹花多糖藥品批準文號即國藥準字B20020023，使得灰樹花多糖真正成為上市藥品，劑型為膠囊劑，內容物為灰樹花粗多糖。目前國內市場上僅有方格藥業一家獲得灰樹花膠囊劑的藥品批文，沒有企業獲得灰樹花注射劑的批文。

本發明所述灰樹花多糖ZZK組分是以灰樹花子實體為原料，經干燥，粉碎，提取，純化等工藝分離得到的一種β葡甘聚糖(ZZK)，該組分在之前的文獻中未見報道。其主要單糖組成是葡萄糖和甘露糖，重均分子量在38～75萬道爾頓，具有顯著的抗腫瘤活性。

(三)發明內容