[發明專利]一種硫氰酸紅霉素的制備方法

有效

• 申請號: 201110396176.X
• 申請日: 2011-12-02
• 公開（公告）號: CN102408462A
• 公開（公告）日: 2012-04-11
• 發明（設計）人: 鄒太平;王利春;劉思川;梁隆;程志鵬;鄧蕓;黃海玉
• 申請（專利權）人: 伊犁川寧生物技術有限公司
• 主分類號: C07H17/08
• 分類號: C07H17/08;C07H1/06;C12P19/62;C12R1/465
• 代理公司: 北京太兆天元知識產權代理有限責任公司 11108
• 代理人: 張韜

1.一種硫氰酸紅霉素的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟：

(1)發酵液濃縮：紅霉素發酵液濃度為5～20％的氫氧化鈉溶液調pH為7.5～9.0，采用50nm～100nm孔徑的陶瓷膜過濾，過濾液用200分子量的納濾膜進行濃縮，得到紅霉素濃縮液；

(2)結晶：將紅霉素濃縮液置于結晶罐，每十億單位紅霉素加入0.15～0.2kg的5～20％硫氰酸鈉溶液，用20～80％的冰醋酸溶液調節pH為5.5～7.0，結晶析出硫氰酸紅霉素，固液混合物經離心分離得硫氰酸紅霉素粗品，硫氰酸紅霉素粗品按照1∶1～1∶8比例加入丙酮，用濃度為5％～20％的氫氧化鈉溶液調節pH為9.5～10.5，將硫氰酸紅霉素轉化成紅霉素堿，靜置，取丙酮溶液，每十億單位紅霉素加入0.15～0.2kg的5～20％硫氰酸鈉溶液，用20～80％冰醋酸溶液調pH至5.5～7.5，按溶解液體積的1～3倍加入45～60℃純化水，控制結晶溫度20～35℃，采用變頻電機緩慢攪拌10分鐘，再靜置降溫0.5～2小時進入離心機分離得硫氰酸紅霉素濕品，硫氰酸紅霉素濕品離心機中分別用丙酮、45～60℃純化水淋洗，離心分離直到母液排出，干燥，即得硫氰酸紅霉素成品；

紅霉素發酵液是按照如下步驟制備的：

(1)紅霉素種子液培養：①母斜面孢子制備：將冷凍保存在砂土管中的紅霉素鏈霉菌(產生菌)孢子接種于經滅菌的斜面培養基上，在溫度32～34℃條件下，培養7～9天；②子斜面孢子制備：將母斜面孢子，接種于經滅菌的斜面培養基上，在溫度32～34℃條件下，培養7～9天；③種子培養：將子斜面孢子，接種于經滅菌的種子培養基，經過三級種子擴大培養，得到紅霉素種子液；

(2)發酵：將紅霉素種子液按10～20％體積比接種于經滅菌的培養基中，通入無菌空氣并開啟攪拌，添加營養物質，經過7～10天培養，得紅霉素發酵液。

2.如權利要求1所述的硫氰酸紅霉素的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟：

(1)發酵液濃縮：紅霉素發酵液用濃度為10％的氫氧化鈉溶液調pH為8.0～8.4，采用50nm～100nm孔徑的陶瓷膜過濾，過濾液用200分子量的納濾膜進行濃縮，得到紅霉素濃縮液。

(2)重結晶：將紅霉素濃縮液置于結晶罐，每十億單位紅霉素加入0.18kg的10％的硫氰酸鈉溶液，用50％的冰醋酸溶液調節pH為6.0～6.5，結晶析出硫氰酸紅霉素，固液混合物經離心分離得硫氰酸紅霉素粗品，硫氰酸紅霉素粗品按照1∶4比例加入丙酮，用濃度為8％的氫氧化鈉溶液調節pH為9.8～10.0，將硫氰酸紅霉素轉化成紅霉素堿，靜置分離，分去下層母液取丙酮溶液，每十億單位紅霉素加入0.18kg的10％的硫氰酸鈉溶液，用50％冰醋酸溶液調pH至6.5，按溶解液體積的1.5倍加入50～55℃純化水，控制結晶溫度25～30℃，采用變頻電機緩慢攪拌10分鐘，，靜置降溫1小時進入離心機分離得硫氰酸紅霉素濕品，硫氰酸紅霉素濕品分別用丙酮、50～55℃純化水在離心機中淋洗，干燥，即得硫氰酸紅霉素成品。

3.如權利要求1所述的硫氰酸紅霉素的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟：

(1)發酵液濃縮：紅霉素發酵液用濃度為15％的氫氧化鈉溶液調pH為7.8～8.2，采用50nm～100nm孔徑的陶瓷膜過濾，過濾液用200分子量的納濾膜進行濃縮，得到紅霉素濃縮液。

(2)重結晶：將紅霉素濃縮液置于結晶罐，每十億單位紅霉素加入0.15kg的15％的硫氰酸鈉溶液，用40％的冰醋酸溶液調節pH為6.0～6.5，結晶析出硫氰酸紅霉素，固液混合物經離心分離得硫氰酸紅霉素粗品，硫氰酸紅霉素粗品按照1∶3比例加入丙酮，用濃度為10％的氫氧化鈉溶液調節pH為9.6～9.8，將硫氰酸紅霉素轉化成紅霉素堿，靜置，取丙酮溶液，每十億單位紅霉素加入0.15kg的15％的硫氰酸鈉溶液，用40％冰醋酸溶液調pH至6.5，按溶解液體積的1.0倍加入50～55℃純化水，控制結晶溫度25～30℃，采用變頻電機緩慢攪拌10分鐘，，靜置降溫1小時進入離心機分離得硫氰酸紅霉素濕品，硫氰酸紅霉素濕品分別用丙酮、50～55℃純化水在離心機中淋洗，干燥，即得硫氰酸紅霉素成品。