[發明專利]南海杜鵑的組織培養與快速繁殖方法無效
| 申請號: | 201110394101.8 | 申請日: | 2011-12-02 |
| 公開(公告)號: | CN103125384A | 公開(公告)日: | 2013-06-05 |
| 發明(設計)人: | 劉家迅 | 申請(專利權)人: | 劉家迅 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 650224 云南省昆明*** | 國省代碼: | 云南;53 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 南海 杜鵑 組織培養 快速 繁殖 方法 | ||
技術領域
本發明涉及一種植物的組織培養與快速繁殖方法,尤其是南海杜鵑的組織培養與快速繁殖方法,屬植物栽培技術領域。
背景技術
南海杜鵑為杜鵑花科杜鵑花屬馬銀花亞屬常綠杜鵑,灌木至小喬木,高1~5米,葉革質,花期4~5個月,花色紫紅色,為我國特有品種,產于廣東、海南等地,是為數不多的幾種低海拔耐熱常綠杜鵑之一,可廣泛用于南方地區園林綠化,也是培養耐熱常綠杜鵑的優秀親本,野生品種極少。南海杜鵑種子量小,出苗率低,扦插困難,因此需要尋找一套新的高效可行的繁殖方法來進行繁殖,以滿足市場需求。
發明內容
本發明的目的在于提供一種南海杜鵑的組織培養與快速繁殖方法,以適應大規模生產優質種苗。
本發明以南海杜鵑一年生嫩枝莖段或莖尖作外植體,并在本發明提供的培養基中進行無菌苗誘導和增殖培養,從而建立無菌快繁體系和組培苗移栽體系,達到種苗快速繁殖和生產要求。
本發明通過下列技術方案完成:一種南海杜鵑的組織培養與快速繁殖方法,其特征在于包括下列工藝步驟:
A、將經過消毒滅菌處理的南海杜鵑外植體,即南海杜鵑一年生嫩枝的莖尖與莖段,接種到下列誘導培養基中:
WPM培養基
糖?????30g/L
瓊脂???4~7g/L
ZT?????2~3mg/L
IAA????0.5~1mg/L
PH????5.0~5.5
在光照強度為1200~1500lx,溫度為20~25℃,光周期為8~10h/d培養條件下,30~35天,外植體萌發分化成叢生芽。切下叢生芽,進入下一步驟;
B、將A步驟切下的叢生芽依次轉接至下列增殖培養基中:
WPM培養基
糖????30g/L
瓊脂??4~7g/L
ZT????0.5~1.2mg/L
IAA???0.1~0.3mg/L
PH????5.0~5.5
在光照強度為1200~1500lx,溫度為20~25℃,光周期為8~10h/d,培養條件下,進行增殖培養,每30~35天,繼代一次,得增殖倍數為2.5~3的叢生芽,如此反復進行增殖培養至所需量的叢生芽,并使叢生芽長成2~3節,高1~2cm的芽苗,切下進入下一步驟;
C、將B步驟切下的芽苗分成單株,接種到下列生根培養基上,在光照強度為1500~2000lx,溫度為20~25℃,光周期為8~10h/d條件下,生根培養至芽苗長大并生根;
WPM培養基
糖????30g/L
瓊脂??4~7g/L
IBA???0.5~1.5mg/L
IAA???0.5~0.8mg/L
PH????5.0~5.5
D、將上述C步驟的生根苗移至室外散射光下鍛煉一周后,取出生根苗,用清水將苗上的培養基洗凈,放入質量濃度為0.1%的多菌靈溶液中消毒1~2分鐘,移栽到裝有下列基質的的營養缽中:腐葉土∶草炭土∶珍珠巖=2∶2∶1體積比的基質中,正常養護,即得南海杜鵑種苗。
所述A步驟對南海杜鵑外植體進行消毒滅菌處理方法為:在超凈工作臺中,將經過清水洗凈的1~2cm莖尖或帶芽莖段,依次在體積濃度為70%~75%的酒精中消毒處理20~40秒、在質量濃度為0.1%~0.15%的升汞溶液中滅菌8~15分鐘、在體積濃度為1.5%~2%的次氯酸鈉溶液中消毒處理15~20分鐘,之后用無菌水漂洗2~3次即可。
所述酒精、升汞、次氯酸鈉、無菌水、多菌靈均為市購的常規產品。
本發明在研究南海杜鵑的組織培養與快速繁殖方法的過程中,通過選擇一年生南海杜鵑嫩枝的莖尖和帶腋芽的莖段作外植體,誘導產生叢生芽,將叢生芽切割接種至繼代培養基中,每30~35天轉接一次,增殖倍數為2.5~3倍,芽苗增殖到適合的數量時,切割芽苗進行生根培養,生根后的組培苗直接栽于營養缽中,獲得了南海杜鵑種苗高效快速繁殖的效果。具體優越性表現如下:
1、提供南海杜鵑離體組培快繁的成套技術,實現了南海杜鵑種苗的規模化、標準化生產。
2、本方法所得后代性狀穩定,無明顯變異。
3、本方法所得后代生長健壯,抗病能力強。
4、本方法可以很好地解決野生南海杜鵑保護與開發這一矛盾。
具體實施方式
以下結合實施例對本發明作進一步的詳細描述。
實施例1
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