[發(fā)明專利]交聯(lián)透明質(zhì)酸水凝膠中交聯(lián)劑1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷殘留量的測定方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110392624.9
• 申請日: 2011-12-01
• 公開（公告）號: CN102435702A
• 公開（公告）日: 2012-05-02
• 發(fā)明（設計）人: 簡軍;李睿智
• 申請（專利權）人: 北京愛美客生物科技有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/12
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司 12207
• 代理人: 王小靜

技術領域

本發(fā)明涉及一種交聯(lián)透明質(zhì)酸中交聯(lián)劑的殘留量測定，具體為交聯(lián)劑1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷的殘留量的測定方法，特別指的是用氣相色譜頂空法測定1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷(DEO)的殘留量。?

背景技術

開發(fā)能應用與臨床的皮膚填充劑，就必須對透明質(zhì)酸進行一系列的化學修飾和處理過程。如果采用非交聯(lián)的透明質(zhì)酸作為皮膚填充劑，那么，在皮膚中天然存在的透明質(zhì)酸酶與自由基就會一個一個的切斷聚合起來的透明質(zhì)酸分子，快速降解非交聯(lián)的透明質(zhì)酸。結果使得透明質(zhì)酸在組織內(nèi)的半衰期只有一天到兩天，然后經(jīng)過水的稀釋，在肝臟內(nèi)逐步降解為水和二氧化碳。這樣，產(chǎn)品在注射的部位就會很快的失去效用(在一周內(nèi))，結果使得非交聯(lián)的透明質(zhì)酸在皮膚中的滯留時間受到了很大的限制。因此，非交聯(lián)的透明質(zhì)酸起不到一個作為皮膚填充劑應該起到的療效。?

采用1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷作為透明質(zhì)酸的交聯(lián)劑，將透明質(zhì)酸的羥基和羧基都交聯(lián)起來，提高了透明質(zhì)酸分子的穩(wěn)定性，有效地防止了透明質(zhì)酸酶和自由基對透明質(zhì)酸的降解作用，明顯地提高了透明質(zhì)酸在皮膚內(nèi)的停留時間，具有量好的作為皮膚填充劑應有的療效。但是，依據(jù)化學材料安全評估報告(Material?Safety?Data?Sheets，簡稱MSDS)，1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷(DEO)對皮膚具有刺激性甚至毒性。在透明質(zhì)酸交聯(lián)反應完全結束后，此交聯(lián)劑必須被清除，以免殘留的交聯(lián)劑對皮膚造成不良的影響。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種交聯(lián)透明質(zhì)酸中交聯(lián)劑1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷殘留量的。采用氣相色譜頂空法測定交聯(lián)透明質(zhì)酸中1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷的殘留量，高溫下將交聯(lián)劑1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷汽化至上層蒸汽中，趁熱抽取蒸汽并進樣，即可檢測到蒸汽中1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷的含量。以確保交聯(lián)透明質(zhì)酸產(chǎn)品的安全性。本發(fā)明操作簡便，安全可靠，適用性強。?

本發(fā)明提供的交聯(lián)透明質(zhì)酸水凝膠中交聯(lián)劑1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷殘留量的測定方法包括的步驟：?

1)標準樣溶液的配置與氣相色譜測試?

用微量注射器抽取2μL?1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷置于中，加10mL純化水溶解作為儲備液。密封后頂空瓶于95℃恒溫40分鐘后，取頂空氣體1mL，進樣檢測，得到色譜圖，積分得到標準樣峰面積。?

2)樣品檢測液的配置與氣相測試?

精密稱取樣品2mL左右，置于頂空瓶中，加水8mL。密封后頂空瓶于95℃恒溫40分鐘后，取頂空氣體1mL，進樣檢測，得到色譜圖，積分得到樣品峰面積。?

3)結果處理：用外標法計算1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷的殘留量。?

1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷殘留量＝(樣品峰面積×標準樣濃度)÷標準樣峰面積。?

由附圖可見，1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷(DEO)標樣在850.1s處出現(xiàn)了一個很強的吸收峰，而去除了1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷(DEO)的交聯(lián)透明質(zhì)酸樣品則沒有在該處出現(xiàn)吸收峰，說明該樣品中的1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷(DEO)含量已經(jīng)低于氣相色譜的最低檢出限，即低于0.1ppm，保證了該交聯(lián)透明質(zhì)酸樣品的安全性。?

本發(fā)明提供的交聯(lián)劑1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷的殘留量的測定方法，可準確地檢測到殘留量的1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷。本發(fā)明操作簡便，安全可靠，適用于使用1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷(DEO)來用作為交聯(lián)劑將透明質(zhì)酸交聯(lián)的反應。?

附圖說明

圖1為DEO標樣的頂空法氣相色譜圖。?

圖2為去除DEO后的交聯(lián)透明質(zhì)酸的頂空法氣相色譜圖。?

具體實施方式

實施例1：標準樣溶液的配置與氣相測試?

用微量注射器抽取2μL?1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷置于頂空瓶中，加10mL純化水溶解作為儲備液。密封后頂空瓶于95℃恒溫40分鐘后，取頂空氣體1mL，進樣檢測，得到色譜圖，積分得到標準樣峰面積。?

實施例2：樣品檢測液的配置與氣相測試?

交聯(lián)劑透明質(zhì)酸水凝膠的制備?