[發(fā)明專利]交聯(lián)透明質(zhì)酸水凝膠中交聯(lián)劑1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷殘留量的測(cè)定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110392624.9
• 申請(qǐng)日: 2011-12-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102435702A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-05-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 簡(jiǎn)軍;李睿智
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京愛(ài)美客生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88;G01N30/12
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司 12207
• 代理人: 王小靜

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種交聯(lián)透明質(zhì)酸中交聯(lián)劑的殘留量測(cè)定，具體為交聯(lián)劑1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷的殘留量的測(cè)定方法，特別指的是用氣相色譜頂空法測(cè)定1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷(DEO)的殘留量。?

背景技術(shù)

開(kāi)發(fā)能應(yīng)用與臨床的皮膚填充劑，就必須對(duì)透明質(zhì)酸進(jìn)行一系列的化學(xué)修飾和處理過(guò)程。如果采用非交聯(lián)的透明質(zhì)酸作為皮膚填充劑，那么，在皮膚中天然存在的透明質(zhì)酸酶與自由基就會(huì)一個(gè)一個(gè)的切斷聚合起來(lái)的透明質(zhì)酸分子，快速降解非交聯(lián)的透明質(zhì)酸。結(jié)果使得透明質(zhì)酸在組織內(nèi)的半衰期只有一天到兩天，然后經(jīng)過(guò)水的稀釋，在肝臟內(nèi)逐步降解為水和二氧化碳。這樣，產(chǎn)品在注射的部位就會(huì)很快的失去效用(在一周內(nèi))，結(jié)果使得非交聯(lián)的透明質(zhì)酸在皮膚中的滯留時(shí)間受到了很大的限制。因此，非交聯(lián)的透明質(zhì)酸起不到一個(gè)作為皮膚填充劑應(yīng)該起到的療效。?

采用1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷作為透明質(zhì)酸的交聯(lián)劑，將透明質(zhì)酸的羥基和羧基都交聯(lián)起來(lái)，提高了透明質(zhì)酸分子的穩(wěn)定性，有效地防止了透明質(zhì)酸酶和自由基對(duì)透明質(zhì)酸的降解作用，明顯地提高了透明質(zhì)酸在皮膚內(nèi)的停留時(shí)間，具有量好的作為皮膚填充劑應(yīng)有的療效。但是，依據(jù)化學(xué)材料安全評(píng)估報(bào)告(Material?Safety?Data?Sheets，簡(jiǎn)稱MSDS)，1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷(DEO)對(duì)皮膚具有刺激性甚至毒性。在透明質(zhì)酸交聯(lián)反應(yīng)完全結(jié)束后，此交聯(lián)劑必須被清除，以免殘留的交聯(lián)劑對(duì)皮膚造成不良的影響。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種交聯(lián)透明質(zhì)酸中交聯(lián)劑1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷殘留量的。采用氣相色譜頂空法測(cè)定交聯(lián)透明質(zhì)酸中1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷的殘留量，高溫下將交聯(lián)劑1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷汽化至上層蒸汽中，趁熱抽取蒸汽并進(jìn)樣，即可檢測(cè)到蒸汽中1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷的含量。以確保交聯(lián)透明質(zhì)酸產(chǎn)品的安全性。本發(fā)明操作簡(jiǎn)便，安全可靠，適用性強(qiáng)。?

本發(fā)明提供的交聯(lián)透明質(zhì)酸水凝膠中交聯(lián)劑1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷殘留量的測(cè)定方法包括的步驟：?

1)標(biāo)準(zhǔn)樣溶液的配置與氣相色譜測(cè)試?

用微量注射器抽取2μL?1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷置于中，加10mL純化水溶解作為儲(chǔ)備液。密封后頂空瓶于95℃恒溫40分鐘后，取頂空氣體1mL，進(jìn)樣檢測(cè)，得到色譜圖，積分得到標(biāo)準(zhǔn)樣峰面積。?

2)樣品檢測(cè)液的配置與氣相測(cè)試?

精密稱取樣品2mL左右，置于頂空瓶中，加水8mL。密封后頂空瓶于95℃恒溫40分鐘后，取頂空氣體1mL，進(jìn)樣檢測(cè)，得到色譜圖，積分得到樣品峰面積。?

3)結(jié)果處理：用外標(biāo)法計(jì)算1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷的殘留量。?

1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷殘留量＝(樣品峰面積×標(biāo)準(zhǔn)樣濃度)÷標(biāo)準(zhǔn)樣峰面積。?

由附圖可見(jiàn)，1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷(DEO)標(biāo)樣在850.1s處出現(xiàn)了一個(gè)很強(qiáng)的吸收峰，而去除了1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷(DEO)的交聯(lián)透明質(zhì)酸樣品則沒(méi)有在該處出現(xiàn)吸收峰，說(shuō)明該樣品中的1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷(DEO)含量已經(jīng)低于氣相色譜的最低檢出限，即低于0.1ppm，保證了該交聯(lián)透明質(zhì)酸樣品的安全性。?

本發(fā)明提供的交聯(lián)劑1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷的殘留量的測(cè)定方法，可準(zhǔn)確地檢測(cè)到殘留量的1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷。本發(fā)明操作簡(jiǎn)便，安全可靠，適用于使用1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷(DEO)來(lái)用作為交聯(lián)劑將透明質(zhì)酸交聯(lián)的反應(yīng)。?

附圖說(shuō)明

圖1為DEO標(biāo)樣的頂空法氣相色譜圖。?

圖2為去除DEO后的交聯(lián)透明質(zhì)酸的頂空法氣相色譜圖。?

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1：標(biāo)準(zhǔn)樣溶液的配置與氣相測(cè)試?

用微量注射器抽取2μL?1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷置于頂空瓶中，加10mL純化水溶解作為儲(chǔ)備液。密封后頂空瓶于95℃恒溫40分鐘后，取頂空氣體1mL，進(jìn)樣檢測(cè)，得到色譜圖，積分得到標(biāo)準(zhǔn)樣峰面積。?

實(shí)施例2：樣品檢測(cè)液的配置與氣相測(cè)試?

交聯(lián)劑透明質(zhì)酸水凝膠的制備?