[發明專利]五味子藥渣中活性成分多糖的制備方法

有效

• 申請號: 201110390820.2
• 申請日: 2011-12-01
• 公開（公告）號: CN102492050A
• 公開（公告）日: 2012-06-13
• 發明（設計）人: 郭志欣;顧地周;朱俊義;秦佳梅;何曉燕;郭璟瑞;魏書文
• 申請（專利權）人: 通化師范學院
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 通化旺維專利商標事務所有限公司 22205
• 代理人: 王偉

技術領域

本發明涉及一種中藥提取方法，即五味子藥渣中活性成分多糖的制備方法。

背景技術

在現有技術中，隨著制藥工業的進步，中草藥有效成分提取工藝的發展，產生了很多中藥藥渣。中藥渣多被作為燃料焚燒或當作垃圾廢棄，這不僅是對資源的極大浪費，同時也對環境造成污染，特別是提取過程中多以乙醇作為溶劑，或者因為入藥需求的原因，僅提取了中藥的某一成分，剩余物中還有大量的活性成分沒有被充分提取出來，殘留在藥渣中，其仍然具有藥用和營養價值。五味子藥渣就是其中的一種。五味子，俗稱山花椒，為木蘭科植物五味子(FructusSchisandraeChinensis)的果實。具有收斂固澀、益氣生津、補腎寧心之功效。目前的研究發現北五味子多糖具有保肝、抗疲勞、免疫促進、抗氧化及抗衰老和抗腫瘤的藥理作用。制藥企業在提取五味子有效成分的過程中大多采用乙醇回流的方式，將五味子中的脂溶性成分提取利用，而水溶性多糖大多殘留于藥渣中被廢棄。

發明內容

本發明的目的是提供一種以五味子藥渣為原料，工藝合理，提取率高的五味子藥渣中活性成分多糖的制備方法。

本發明的技術解決方案是：五味子藥渣中活性成分多糖的制備方法，步驟如下：

(1)原料處理：將五味子藥渣常溫干燥或40～50℃烘干。

(2)多糖提取：按每公斤五味子藥渣加水10～30公斤，在60～100℃的溫度下浸提2～6小時；沉淀再用同樣方法重復提取1～2次，合并提取液；

(3)醇沉：將提取液于60℃濃縮至原體積的1/6～1/5，之后冷卻，加入3倍體積95％的乙醇，4℃醇沉過夜，離心，沉淀用無水乙醇和乙醚洗滌后干燥。

(4)凍融：將沉淀配成5％的糖液，過夜凍實，常溫融化，當為冰水混合物時，離心，上清重復上述冷凍步驟2～5次；凍融可以除去多糖中的雜質。

(5)乙醇分級：在凍融后糖液內加乙醇至終濃度為30％，4℃沉淀2～3天，離心，沉淀干燥；上清加乙醇至終濃度為60％，4℃沉淀2～3天，離心，沉淀干燥；

(6)除蛋白：將沉淀配成5％的糖液，加入鏈蛋白酶，比例為蛋白∶蛋白酶＝200∶1，37℃酶解45～50小時脫蛋白，取出后濃縮至原體積，再用Sevag法(氯仿∶正丁醇＝4∶1)脫蛋白3～6次后得到多糖溶液；

(7)干燥：將多糖溶液冷凍干燥過夜，得到五味子藥渣多糖。經紅外光譜分析，其具有多糖的特征性吸收峰。

五味子藥渣中活性成分多糖的制備方法，步驟如下：

(1)原料處理：將五味子藥渣常溫干燥或45℃烘干；

(2)多糖提取：按每公斤五味子藥渣加水30公斤，在100℃的溫度下浸提2小時；沉淀再用同樣方法重復提取2次，合并提取液；

(3)醇沉：將提取液于60℃濃縮至原體積的1/6，之后冷卻，加入3倍體積95％的乙醇，4℃醇沉過夜，離心，沉淀用無水乙醇和乙醚洗滌后干燥；

(4)凍融：將沉淀配成5％的糖液，過夜凍實，常溫融化，當為冰水混合物時，離心，上清重復上述冷凍步驟4次；

(5)乙醇分級：在凍融后糖液內加乙醇至終濃度為30％，4℃沉淀3天，離心，沉淀干燥；上清加乙醇至終濃度為60％，4℃沉淀2～3天，離心，沉淀干燥；

(6)除蛋白：將沉淀配成5％的糖液，加入鏈蛋白酶，比例為蛋白∶蛋白酶＝200∶1，37℃酶解48小時脫蛋白，取出后濃縮至原體積，再用Sevag法脫蛋白5次后得到多糖溶液；

(7)干燥：將多糖溶液冷凍干燥過夜，得到五味子藥渣多糖。

所述乙醇分級加入乙醇時將乙醇放入分液漏斗，盛糖液器皿放于磁力攪拌器上，使乙醇逐滴加入。

五味子藥渣為護肝片生產后剩余五味子殘渣。

所述的水為去離子水、蒸餾水、純水或含礦物離子水。

步驟(3)中離心轉速3000r/min，時間10min。

步驟(4)中離心轉速7000r/min，溫度4℃，時間10min。

本發明的優點是：1、工藝合理，注重合理利用原料，將制藥企業的廢料五味子藥渣充分利用，既避免了浪費又有利于環境保護。2、本發明在提取的過程中，利用的最佳的提取工藝，大大的提高了提取率。3、本發明在乙醇分級過程中，采用邊攪拌邊滴加乙醇的方法，比普通的醇沉效果好，提高多糖的得率。4、本發明利用了鏈蛋白酶和Sevag法聯合脫蛋白，脫除次數少，操作過程簡化。

下面將結合實施例對本發明的實施方式作進一步詳細描述。

具體實施方式

實施例1