[發明專利]一種玻璃酸鈉發酵液的前處理方法

無效

• 申請號: 201110389618.8
• 申請日: 2011-11-30
• 公開（公告）號: CN102516411A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發明（設計）人: 曾輝;張延良;張冬良
• 申請（專利權）人: 上海景峰制藥有限公司
• 主分類號: C08B37/08
• 分類號: C08B37/08
• 代理公司: 上海天翔知識產權代理有限公司 31224
• 代理人: 呂伴

技術領域：

本發明涉及一種玻璃酸鈉發酵液的處理方法，特別涉及一種玻璃酸鈉發酵液的前處理方法。

背景技術：

玻璃酸(Hyaluronic?acid，簡稱HA)，是由(1→3)-2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-葡萄糖-(1→4)-O-β-D-葡糖醛酸雙糖重復單位所組成的直鏈多聚糖，分子式為(C₁₄H₂₁NO₁₁)n，依據組織來源不同，分子量變化范圍為2×105～7×106，雙糖單位數為300～11000對。不同來源的玻璃酸的結構一致，無種屬差異，只存在相對分子量的區別，其結構式為：

商品玻璃酸一般為鈉鹽形式，為白纖維狀或粉末狀固體，有較強的吸濕性，溶于水，不溶于有機溶劑。玻璃酸鈉的大分子網狀結構通過與H₂O形成氫鍵結合大量的水，在體內具有構成多種基質、調節滲透壓、調控大分子物質的轉運、在細胞周圍形成物理屏障以及調節細胞功能等作用。玻璃酸鈉可作為眼科手術輔助用藥及變形性膝關節病和肩關節周圍炎的輔助治療，還在組織生成、創傷愈合、腫瘤入侵和調節細胞功能諸方面具有重要的生理功能。

目前國內的醫用級玻璃酸鈉的生產大多是動物組織提取的生產工藝，原料成本較高，來源受限，且存在動物源性風險。而發酵法生產玻璃酸鈉，通過基因技術，能夠篩選出不含內毒素和外毒素且高產HA的變異菌株，較組織提取更加安全；發酵液與動物組織比較，組成成分簡單，更有利于提取與純化，制備高純度HA；能夠保證生產原料來源不受限制，且原料成本更加低廉。

在以往的公開的文獻中，玻璃酸鈉發酵液的處理方式通常是直接用有機溶劑沉淀或是預鋪助濾劑進行過濾。使用有機溶劑沉淀的方法，有機溶劑使用量大，成本高，而且有機溶劑的使用、儲存都存在安全風險，有機溶劑的排放及處理存在污染的風險；用預鋪助濾劑進行過濾的方法，預鋪效果較差，助濾劑預鋪不均勻，會導致過濾時間長，而且過濾時容易發生堵塞，因此以上兩種方法在工業化生產中均有不足。

發明內容：

本發明的目的在于提供一種玻璃酸鈉發酵液的前處理方法，以克服上述玻璃酸鈉發酵液處理方法的不足，該方法成本低、安全、有效。

為實現本發明的目的，本發明所采用的技術方案是：

一種玻璃酸鈉發酵液的前處理方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將玻璃酸鈉發酵液加水稀釋至其體積的2～5倍制得懸濁液；

(2)將步驟(1)所得的懸濁液，在攪拌條件下加入硅藻土，攪拌均勻后，通過板框過濾機，循環該步驟至發酵液澄清；

(3)將步驟(2)所得的濾液用濾芯微濾除菌澄清的玻璃酸鈉發酵液。

在本發明的一優選實施例中，每100L懸濁液加入硅藻土的量為1～10kg。

在本發明的一優選實施例中，所述濾芯是0.22um。

在本發明的一優選實施例中，板框中硅藻土濾餅的量為0.4～2.0kg/m²。

本發明的玻璃酸鈉發酵液的前處理方法中，硅藻土吸附后，通過物理方法的過濾和微濾來達到玻璃酸鈉發酵液的除菌目的，其成本低、安全、有效；利用本方法處理的玻璃酸鈉發酵液，可基本去除發酵液中菌體，有效減少了核酸和蛋白等雜質的含量，特別適合醫藥級玻璃酸鈉的工業化生產，并且由該方法處理過的玻璃酸鈉發酵液的透光率比較高。

具體實施方式：

通過下面具體實施例進一步說明本發明，但它們不是對本發明的限定。

實施例1：

取玻璃酸鈉發酵液20L，加純化水20L進行稀釋得玻璃酸鈉發酵液懸濁液，在攪拌條件下向玻璃酸鈉發酵液懸濁液中加入硅藻土，硅藻土的加入量為每100L玻璃酸鈉發酵液懸濁液加入硅藻土5g，攪拌均勻后，通過過濾面積為2m²的板框過濾機，使得板框中硅藻土濾餅的量為1.0kg/m²，循環加入硅藻土吸附和通過板框過濾機過濾至發酵液澄清，再通過0.22um濾芯微濾，獲得除菌澄清的玻璃酸鈉發酵液。測得過濾時的平均流速為5.4L/min，過濾后發酵液的透光率為91.4％。

實施例2：