[發明專利]一種長期培養無菌松苗的方法

有效

• 申請號: 201110388418.0
• 申請日: 2011-11-30
• 公開（公告）號: CN102487822A
• 公開（公告）日: 2012-06-13
• 發明（設計）人: 朱麗華;葉建仁;吳小芹;李清清;安會翠
• 申請（專利權）人: 南京林業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 邱興天

1.一種長期培養無菌松苗的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）制備PDA平板備用；

（2）制備無菌松樹成熟種子，移入PDA瓊脂平板，25℃，培養至萌發，獲得無菌幼苗；

（3）制備DCR液體培養基，pH5.8，分裝于培養容器；

（4）在底部帶小孔容器底部墊上脫脂棉，上部填入珍珠巖，將該容器置于盛有DCR液體培養基的培養容器中，121℃高壓滅菌，備用；

（5）將無菌幼苗移植于珍珠巖中，于溫度24~26℃、光照2000?Lux、每日光照14~18h條件下培養，定期更換DCR新鮮培養液，直至獲得所需年齡的無菌松苗。

2.根據權利要求1所述的長期培養無菌松苗的方法，其特征在于：步驟（2）中，制備無菌松樹成熟種子的方法為：取松樹成熟種子，用洗潔精將其表面洗凈，0.1%高錳酸鉀浸泡12h，流水沖洗1h，在無菌條件下剝除種殼，用無菌紗布包裹去殼種子，置于70%乙醇表面消毒30~35s后再用0.1%升汞處理3~4min，用無菌水沖洗3~5次。

3.根據權利要求1所述的長期培養無菌松苗的方法，其特征在于：步驟（3）中，分裝于培養容器，每個容量為30~40mL。

4.根據權利要求1所述的長期培養無菌松苗的方法，其特征在于：步驟（5）中，定期更換為每1個半月到2個半月更換一次。