[發明專利]嬰兒雙歧桿菌及其制劑

有效

• 申請號: 201110388295.0
• 申請日: 2011-11-29
• 公開（公告）號: CN103131647B
• 公開（公告）日: 2017-06-27
• 發明（設計）人: 陳蓓;張軍東;王莎莎;汪忠慧;于鴻晶;沈頤涵
• 申請（專利權）人: 上海上藥信誼藥廠有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;A61K35/745;A61K9/19;A61K47/46;A61P1/00;A61P1/12;A61P35/00;A61P37/02;C12R1/01
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司31100
• 代理人: 陳哲鋒

技術領域

本發明涉及新的嬰兒雙歧桿菌(Bifidobacterium infantis)菌株、即制備方法以及在治療胃腸道功能紊亂性疾病的用途。

背景技術

雙歧桿菌是人和動物腸道內重要的生理性細菌，它對促進人體的發育、維持和提高免疫力、延緩機體衰老等方面起著重要作用。近百年的研究證明雙歧桿菌是人類腸道內的優勢菌群。人體在成長過程中，由于疾病、衰老等原因，體內雙歧桿菌在數量上和總菌占有率上逐漸下降。因此，有人將體內雙歧桿菌的數量作為健康的標志之一。新生兒腸道中雙歧桿菌占細菌總數的92％，其隨年齡增長而減少，至老年臨終前完全消失。雙歧桿菌在生長發育過程中隨時被消耗，又隨時增長達到一定的平衡；但當人進入中老年，其自我調節能力減弱，適時地進行外源性補充，對保持和促進機體健康具有積極的意義，所以雙歧桿菌制品越來越多的受到人們的歡迎。

目前采用的培養雙歧桿菌的培養基配方較復雜，質量及生產條件控制不易，原料種類多，不適宜大規模發酵時應用，且發酵量較低，難以達到生產要求；凍干保護劑種類繁多，比例各異，凍干工藝不成熟，凍干品種活菌率低，保存時間也不長，直接影響了雙歧活菌制劑的質量。

目前本領域中急需新的嬰兒雙歧桿菌及其制備方法，用于有效治療胃腸道功能紊亂性疾病。

發明內容

本發明的目的在于提供一種新的嬰兒雙歧桿菌及其制備方法，用于有效治療胃腸道功能紊亂性疾病。

本發明一方面提供了一種嬰兒雙歧桿菌菌株IFA09，其保藏號為CCTCCNO：M2011310。

本發明另一方面提供了一種制備本發明所述嬰兒雙歧桿菌菌株IFA09的方法，其特征在于，所述的嬰兒雙歧桿菌菌株IFA09是通過如下方法獲得的：

(a)在下述液體培養基中加入新鮮的健康嬰兒的糞便，攪拌均勻后離心，取上清液放入厭氧培養箱中25-42℃培養18-30小時；

(b)取0.05-0.2mL培養液接種于厭氧血瓊脂平板，在厭氧培養箱中于25-42℃培養36-72小時后，挑單菌落劃線接種于厭氧培養平板，然后將所述厭氧培養平板置于厭氧培養箱中于25-42℃培養36-72小時；

(c)然后將厭氧培養平板上的菌種進行鏡檢觀察，并做生理生化試驗、遺傳學鑒定、脂肪酸分析及抗生素敏感試驗，從而獲得嬰兒雙歧桿菌菌株IFA09 CCTCCNO：M2011310。

在本發明的一個優選實例中，所述培養基優選包括2-20重量份的胰蛋白胨、1-15重量份的酵母提取物、0.05-1重量份的L-半胱氨酸鹽酸鹽、1-15重量份的葡萄糖、0.0005-0.01重量份的氯化鈣、0.0005-0.01重量份的硫酸鎂、0.005-0.2重量份的磷酸二氫鉀和0.005-0.2重量份的磷酸氫二鉀；優選地，所述培養基包括5-15重量份的胰蛋白胨、2-7.5重量份的酵母提取物、0.1-0.5重量份的L-半胱氨酸鹽酸鹽、2-7.5重量份的葡萄糖、0.001-0.005重量份的氯化鈣、0.000-0.005重量份的硫酸鎂、0.01-0.05重量份的磷酸二氫鉀和0.01-0.05重量份的磷酸氫二鉀。

本發明還提供了一種藥物組合物，所述藥物組合物包括本發明所述的嬰兒雙歧桿菌菌株IFA09 CCTCC NO：M2011310。

本發明另一發面提供了一種嬰兒雙歧桿菌凍干粉制劑，它包括嬰兒雙歧桿菌菌株IFA09 CCTCC NO：M2011310菌粉和保護劑。

在本發明的一個優選實例中，所述保護劑包含脫脂奶粉0.1-30重量份、谷氨酸鈉0.01-10重量份、甘露醇0.01-20重量份、Vc-Na 0.001-10重量份、淀粉0.1-30重量份；優選地，所述保護劑含脫脂奶粉0.5-20重量份、谷氨酸鈉0.05-5重量份、甘露醇0.01-10重量份、Vc-Na 0.001-5重量份、淀粉0.5-20重量份；更優選地，所述含脫脂奶粉1.5-7.5重量份、谷氨酸鈉0.15-1.5重量份、甘露醇0.1-1重量份、Vc-Na 0.003-1.5重量份、淀粉1.5-6重量份。

在本發明的一個優選實例中，所述保護劑的用量為0.1-99.9重量份，優選為20-90重量份，更優選為30-80重量份，最優選為40-60重量份。

本發面另一方面提供了一種本發面所述凍干粉制劑的制備方法，所述方法包括以下步驟：