[發明專利]一種提高利用木霉菌生產酸性纖維素酶的產量的生產方法

無效

• 申請號: 201110388282.3
• 申請日: 2011-11-29
• 公開（公告）號: CN102392006A
• 公開（公告）日: 2012-03-28
• 發明（設計）人: 陳樹林;賈文娣;錢世鈞;武改紅;馬立娟;馬延和
• 申請（專利權）人: 天津工業生物技術研究所
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;C12R1/885
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369
• 代理人: 史霞

1.一種提高利用木霉菌生產酸性纖維素酶的產量的生產方法，其特征在于，包括有以下步驟：

步驟一、制備木霉菌種種子液；

步驟二、預生產階段：將所述木霉菌種種子液接種于預生產發酵培養基中，調節初始pH值在3.0～7.0，開始進行發酵，測定在發酵過程中，預生產發酵培養基的pH值開始持續增長的拐點，確定拐點時間T；

步驟三、生產階段：將所述木霉菌種種子液接種于與所述預生產發酵培養基組分及組分含量完全相同的生產發酵培養基中，調節初始pH值也相同，開始進行發酵，發酵過程中，對所述生產發酵培養基的pH值進行分段調節，調節方法如下：(1)發酵開始至所述拐點時間T為第一時段，對所述生產發酵培養基的pH值不加控制，(2)從所述拐點時間T至發酵結束為第二時段，控制所述生產發酵培養基的pH值在4.0～5.3。

2.如權利要求1所述的提高利用木霉菌生產酸性纖維素酶的產量的生產方法，其特征在于，其中，按質量百分比計，所述預生產發酵培養基還包括：微晶纖維素3％～7％，有機氮源2～4％，無機氮源0.3～0.6％，無機鹽0.6～1.3％，甘油0.15～0.4％，以及溶劑水。

3.如權利要求1或2所述的提高利用木霉菌生產酸性纖維素酶的產量的生產方法，其特征在于，所述步驟二中，調節所述預生產發酵培養基的初始pH值在4.5～5.5。

4.如權利要求3所述的提高利用木霉菌生產酸性纖維素酶的產量的生產方法，其特征在于，所述步驟三中，發酵過程中，從時間拐點T至發酵結束的第二時段，控制所述生產發酵培養基的pH值在4.7～5.1。

5.如權利要求3所述的提高利用木霉菌生產酸性纖維素酶的產量的生產方法，其特征在于，所述步驟三中，在所述發酵過程中，發酵20h至80h，控制所述生產發酵培養基的中的溶解氧的體積百分比在30％～40％，發酵80h至發酵結束，控制所述生產發酵培養基的溶解氧的體積百分比在20％～30％。

6.如權利要求2所述的提高利用木霉菌生產酸性纖維素酶的產量的生產方法，其特征在于，步驟二中，微晶纖維素占所述預生產發酵培養基的總質量的5％。

7.如權利要求1所述的提高利用木霉菌生產酸性纖維素酶的產量的生產方法，其特征在于，所述步驟二和步驟三中，發酵過程中的溫度控制在25～30℃。

8.如權利要求1所述的提高利用木霉菌生產酸性纖維素酶的產量的生產方法，其特征在于，所述步驟二中，所述預生產發酵培養基的體積為0.1L；所述步驟三中，所述生產發酵培養基的體積為3L。

9.如權利要求1所述的提高利用木霉菌生產酸性纖維素酶的產量的生產方法，其特征在于，所述步驟二和步驟三中，發酵過程是在250～350r/min恒溫搖床上震蕩培養。

10.如權利要求1所述的提高利用木霉菌生產酸性纖維素酶的產量的生產方法，其特征在于，所述步驟一中，制備木霉菌種種子液的方法是，將木霉菌種孢子懸浮液接入活化培養基中，在28～30℃，170～200r/min恒溫搖床上震蕩培養24～36h得到菌種種子液，其中，所述活化培養基包括微晶纖維素1～4％，玉米漿1～2％，以及溶劑水，調節初始pH值4.0～5.0。