[發(fā)明專利]一種用中草藥對(duì)超氧自由基的清除方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110388038.7
• 申請(qǐng)日: 2011-11-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103134845A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉桐言
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 劉桐言
• 主分類號(hào): G01N27/48
• 分類號(hào): G01N27/48
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用中草藥對(duì)超氧自由基的清除方法。

背景技術(shù)

自由基在人體內(nèi)能引起機(jī)體氧化，損害細(xì)胞，導(dǎo)致機(jī)體衰老和各種疾病。自由基是一種外層軌道含有未配對(duì)電子的特殊狀態(tài)分子或原子團(tuán)，其中超氧自由基(O-2·)與人體最為密切。一些物質(zhì)，如超氧化物歧化酶(SOD)、維生素C、維生素E、胡蘿卜素等能清除人體的自由基。但體內(nèi)的O-2·濃度隨年齡的增長(zhǎng)而增加，自由基清除能力則隨年齡的增加而減少，有時(shí)不能提供足夠的量來(lái)消除O-2·。因此研究和尋找外源性O(shè)-2·清除劑在人體保健、治病方面，從天然動(dòng)植物，尤其是從中草藥中尋找高效的超氧自由基清除劑，具有重要意義。分子氧在單電子還原時(shí)有超氧陰離子自由基O-2·中間體生成。O-2·既可作為電子的給予體，又可接受電子，在體內(nèi)可通過(guò)電子轉(zhuǎn)移反應(yīng)衍生出其它活性氧。從研究的角度來(lái)說(shuō)，獲得O-2·有多種方法。且采用化學(xué)法產(chǎn)生O-2·，對(duì)比了鄰苯三酚、亞甲基蘭、二甲基亞砜生成O-2·的效率。

中草藥含有多種能夠清除自由基的化合物，其抗氧化成分可歸納為6大類：黃酮類、苯酚類、皂苷類、鞣質(zhì)類、生物堿類和其他類。近年來(lái)對(duì)中藥抗自由基作用的研究多采用電子自旋共振、化學(xué)發(fā)生等方法，用電化學(xué)方法研究中藥對(duì)超氧自由基的清除作用還未發(fā)現(xiàn)。但是后者也有其優(yōu)勢(shì)所在，所用儀器簡(jiǎn)單，操作簡(jiǎn)單，成本低，相對(duì)于化學(xué)發(fā)光法，不受到溶液顏色和惰性雜質(zhì)的影響。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的技術(shù)方案在于利用電化學(xué)分析方法，采用中草藥對(duì)超氧自由基的清除，延緩機(jī)體衰老。

為了實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)方案，本發(fā)明采用的具體步驟如下：

一、采用的實(shí)驗(yàn)儀器和試劑及中草藥的選擇

(一)采用的儀器

1、極譜分析儀：JP-303型極譜分析儀(甘肅分析儀器廠)；

2、三電極系統(tǒng)：滴汞電極、飽和甘汞電極和鉑電極組成的三電極系統(tǒng)；

3、電子天平：(AL104，梅特勒-托利多儀器有限公司)；

4、酸度計(jì)PHS-3C型酸度計(jì)(甘肅科學(xué)分析儀器廠)。

(二)采用的試劑

1、鄰苯三酚為(蘭州興隆化工有限公司)，

2、三羥甲基氨基甲烷為(蘭州興隆化工有限公司)，

3、其余試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純，實(shí)驗(yàn)用水均為二次蒸餾水。

(三)采用的中草藥有：紅花、何首烏、當(dāng)歸、苡米、白芷、丹參、黃芩、茯苓。

二、采用的方法與結(jié)果

1、采用超氧自由基化學(xué)發(fā)生體系的方法

分別制取0.2mmol/L鄰苯三酚溶液、1mg/ml亞甲基蘭溶液、3.5mg/ml二甲基亞砜溶液、0.2mol/L三羥甲基氨基甲烷溶液、pH＝9.0的NH3-NH4Cl緩沖溶液。在25.0ml的0.2mol/L三羥甲基氨基甲烷溶液中加入5.0ml的0.1mol/L鹽酸，稀釋至100ml，得到pH＝9.0的緩沖溶液。取10.0ml為底液，加入1.0ml的0.2mmol/L鄰苯三酚溶液，再加2.00ml蒸餾水。采用線性掃描法記錄二階導(dǎo)數(shù)極譜波。

移取10.0ml?pH＝9.0的NH3-NH4Cl緩沖溶液，加入1.0ml的3.5mg/ml二甲基亞砜溶液，再加2.0ml蒸餾水。采用線性掃描法記錄二階導(dǎo)數(shù)極譜波。移取10.0ml?pH＝9.0的NH3-NH4Cl緩沖溶液，加入1.0ml的1mg/ml亞甲基蘭溶液，再加2.0ml蒸餾水。采用線性掃描法記錄二階導(dǎo)數(shù)極譜波。

2、超氧自由基化學(xué)發(fā)生體系的結(jié)果，在pH＝9.0的HCl-Tris緩沖溶液中，鄰苯三酚可發(fā)生自氧化反應(yīng)產(chǎn)生超氧自由基陰離子，在-0.676V處有一還原峰，此峰為檢測(cè)對(duì)象，它先逐漸增高，到一定時(shí)間后又緩慢降低。峰高隨時(shí)間變化。此峰在4.0min處最高，且變化較小，記錄該峰在此時(shí)間點(diǎn)的峰高值作為空白對(duì)照讀數(shù)。在pH＝9.0的NH3-NH4Cl緩沖溶液中，二甲基亞砜和亞甲基蘭均可發(fā)生自氧化反應(yīng)產(chǎn)生超氧自由基陰離子，兩者分別在-0.700V、-0.682V處有一還原峰，峰形均先逐漸增高，到一定時(shí)間后又緩慢降低。峰高隨時(shí)間的變化，二甲基亞砜在4.0min處最高，且變化較小；亞甲基蘭在3.0min處最高，且變化較小。分別取此峰高最大處的時(shí)間點(diǎn)作為分析點(diǎn)，記錄峰高值作為空白對(duì)照讀數(shù)。

三、中草藥清除超氧自由基的方法