[發明專利]一種從蠶體中提取純化高純度墨蝶呤的方法有效
| 申請號: | 201110387345.3 | 申請日: | 2011-11-30 |
| 公開(公告)號: | CN102516246A | 公開(公告)日: | 2012-06-27 |
| 發明(設計)人: | 孟艷;王敬;高俊山;王文靜;劉朝良 | 申請(專利權)人: | 安徽農業大學 |
| 主分類號: | C07D475/04 | 分類號: | C07D475/04 |
| 代理公司: | 安徽合肥華信知識產權代理有限公司 34112 | 代理人: | 余成俊 |
| 地址: | 230036 *** | 國省代碼: | 安徽;34 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 蠶體中 提取 純化 純度 蝶呤 方法 | ||
1.一種從蠶體中提取純化高純度墨蝶呤的方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)、解剖蠶體,盡可能剔除內臟組織,保存體壁;
(2)、稱取一定量的蠶體壁,用剪刀剪成碎片,按照料液比1:(18-22)加入濃度為45-55%的乙醇,用高速組織破碎機制成勻漿,在95-105℃沸水浴中加熱8-12min;
(3)、將加熱后的勻漿進行離心分離,轉速為15000rpm,離心溫度為3-5℃,?離心時間28-32min,收集上清液;
(4)、上清液通過濾紙進行過濾,在25-30℃下減壓真空濃縮濾液至原體積的1/5-1/7;
(5)、濃縮液經ECTEOLA纖維素柱吸附,先用純水洗脫柱子,待色素完全分離開間距超過5cm后用0.01M乙酸洗脫柱子,收集含墨蝶呤色素條帶的洗脫液;
(6)、將洗脫液濃縮至干后溶解于適量純水中,得到黃色溶液;
?(7)、黃色溶液經Sephadex?G-25-150柱純化,用純水洗脫,收集色素洗脫液;
(8)、重復步驟(6);
(9)、將黃色溶液用磷酸纖維素柱進一步純化,用純水洗脫,收集色素洗脫液;
(10)、最后再將步驟(9)所得色素洗脫液濃縮至干,即得高純度的墨蝶呤。
2.根據權利要求1所述的一種從蠶體中提取純化高純度墨蝶呤的方法,其特征在于:步驟(2)中加入乙醇時,蠶體壁碎片與乙醇的的料液比為1:20,所加的乙醇為50%的乙醇溶液。
3.根據權利要求1所述的一種從蠶體中提取純化高純度墨蝶呤的方法,其特征在于:步驟(3)的離心溫度為4℃,步驟(4)的濃縮溫度為30℃。
4.根據權利要求1所述的一種從蠶體中提取純化高純度墨蝶呤的方法,其特征在于:步驟(4)至步驟(10)的操作在室溫下的暗室中進行。
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