[發明專利]一種N-乙酰基谷氨酸甘油酯的酶合成方法有效
| 申請號: | 201110384282.6 | 申請日: | 2011-11-28 |
| 公開(公告)號: | CN102492736A | 公開(公告)日: | 2012-06-13 |
| 發明(設計)人: | 孟祥河;潘秋月;陸麗梅 | 申請(專利權)人: | 浙江工業大學 |
| 主分類號: | C12P7/62 | 分類號: | C12P7/62 |
| 代理公司: | 杭州天正專利事務所有限公司 33201 | 代理人: | 黃美娟;王兵 |
| 地址: | 310014 浙*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 乙酰 谷氨酸 甘油酯 合成 方法 | ||
1.一種N-乙酰基谷氨酸甘油酯的酶合成方法,其特征在于所述方法為:以N-酰基氨基酸和甘油為底物,無溶劑條件下,在酶的作用下,30~80℃,反應1~96h,反應結束后反應液后處理,獲得所述的N-乙酰基谷氨酸甘油酯;所述酶為固定化脂肪酶Novozyme?435、固定化脂肪酶Lipozyme?RM?IM、固定化脂肪酶Lipozyme?TL?IM、木瓜蛋白酶、脂肪酶FAP15、酰基轉移酶或胰蛋白酶。
2.如權利要求1所述的N-乙酰基谷氨酸甘油酯的酶合成方法,其特征在于所述N-酰基氨基酸與甘油的物質的量比為1∶5~30。
3.如權利要求1所述的N-乙酰基谷氨酸甘油酯的酶合成方法,其特征在于所述酶為固定化脂肪酶Novozyme435或固定化脂肪酶Lipozyme?RM?IM。
4.如權利要求1所述的N-乙酰基谷氨酸甘油酯的酶合成方法,其特征在于所述酶的質量用量以底物總質量計為0.5~10%。
5.如權利要求1所述的N-乙酰基谷氨酸甘油酯的酶合成方法,其特征在于所述反應液后處理方法為:反應結束后,分別加入反應液體積1.5倍的5%NaCl溶液和反應液體積2倍的0.5mol/L碳酸氫鈉溶液,攪拌至無氣泡生成,過濾,濾液冷卻至室溫用有機溶劑萃取,收集有機相,干燥至恒重,獲得所述的N-乙酰基谷氨酸甘油酯;所述有機溶劑為正己烷、氯仿或乙酸乙酯。
6.如權利要求1所述的N-乙酰基谷氨酸甘油酯的酶合成方法,其特征在于所述方法按以下步驟進行:將N-酰基氨基酸和甘油以物質的量比1∶20~30混合后作為底物,升溫至70℃,無溶劑條件下,在固定化脂肪酶Novozyme?435的作用下,pH6.0~9.0磷酸緩沖溶液中,30~70℃反應96h,反應結束后,反應液中加入反應液體積1.5倍的5%NaCl溶液和反應液體積2倍的0.5mol/L碳酸氫鈉溶液,攪拌至無氣泡生成,過濾,濾液冷卻至室溫用有機溶劑萃取,收集有機相,干燥至恒重,獲得所述的N-乙酰基谷氨酸甘油酯;所述固定化脂肪酶Novozyme?435的質量用量以N-酰基氨基酸和甘油總質量計為5~10%,所述有機溶劑為氯仿或乙酸乙酯。
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