[發明專利]一種金銀花組織培養及其培養基制備

無效

• 申請號: 201110383253.8
• 申請日: 2011-11-25
• 公開（公告）號: CN103125379A
• 公開（公告）日: 2013-06-05
• 發明（設計）人: 劉金峰
• 申請（專利權）人: 劉金峰
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;C12N5/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及植物組織培養及其培養基的制作方法，屬于生物細胞工程技術領域，具體地說是一種金銀花組織培養及其培養基制備。

背景技術

金銀花(Lonicera?Japonica)又名忍冬，為忍冬科多年生半常綠纏繞木質藤本植物。“金銀花”一名出自《本草綱目》，由于忍冬花初開為白色，后轉為黃色，因此得名金銀花。藥材金銀花為忍冬科忍冬屬植物忍冬及同屬植物干燥花蕾或帶初開的花。金銀花自古被譽為清熱解毒的良藥。它性甘寒氣芳香，甘寒清熱而不傷胃，芳香透達又可祛邪。金銀花既能宣散風熱，還善清解血毒，用于各種熱性病，如身熱、發疹、發斑、熱毒瘡癰、咽喉腫痛等證，均效果顯著。含綠原酸類、甙類、黃酮類、揮發油類成分；甙類成分包括皂甙、環烯醚萜甙等，如以長春藤甙元為配基的三萜皂甙、以石竹素為甙元的三萜皂甙；黃酮類化合物木犀草素-7-O-a-D-葡萄糖甙、木犀草素-7-O-b-D-半乳糖甙、槲皮素-3-O-b-D-葡萄糖甙、金絲桃甙等；揮發油中含30種以上成分，主成分為雙花醇和芳樟醇。此外，有報道從金銀花葉子中分得8種醇甙或酚甙，主要為多元醇甙、異木酚素甙、香豆素甙等。

發明內容

本發明旨在提供一種金銀花組織培養及其培養基制備，以金銀花器官、組織和細胞進行組織培養和改良，實現金銀花量產。

為實現上述目的，本發明所述一種金銀花組織培養及其培養基制備，其特征在于：取金銀花的種胚經消毒后在該培養基上培養，在25±1℃，光照2000Lux下培養60天，產生出叢生芽，轉移到培養基相似的試管里，仍在上述條件下培養，10～15天就可誘導生根。

本發明所述一種金銀花組織培養及其培養基制備，其特征在于：實現步驟如下：

一、外植體的選取與處理：首先選取金銀花葉片，葉片先用0.1～0.3％的洗滌精溶液小心洗凈后，自來水沖洗25～30分鐘后，接著在無菌條件下，用75～80％酒精處理30秒，再用0.1％升汞消毒滅菌8～10分鐘，用無菌去離子水漂洗4次，每次漂洗5分鐘，之后，在超凈工作臺上用滅菌的醫用手術刀將葉片切成1.5～2.0cm的具葉脈的葉片外植體；

二、將切好的葉片外植體，接入下列培養基中培養，培養室溫度23～28℃，光照強度為2000～2500Lux，每天14h光照；

三、將具根及幾個完整葉芽打開瓶口，于散射光下練苗兩天后，移栽至盛大田中，并用塑料薄膜封口，溫度控制在24℃，相對濕度為80～85％及散射光下保溫保濕3天后，去掉薄膜，移至遮蔭大棚中生長，成活率達99％以上，且栽培30天后就可從移栽的小苗上長出健康的。

所述培養基為：KNO₃?1200mg/L、NH₄NO₃?1800mg/L、KH₂PO₄?200mg/L、CuCl₂?400mg/L、H₂BO₃?1mg/L、MnSO₄H₂O?0.5mg/L、ZnSO₄7H₂O?1.0mg/L、CuSO₄5H₂O?0.1mg/L、鐵鹽5.0mg/L、甘氨酸10.0mg/L、煙酸2.0mg/L、瓊脂6000mg/L、紅糖30000mg/L、赤霉素1～5mg/L、激動素1～3mg/L、鹽酸吡哆素5.0mg/L、鹽酸硫胺1.0mg/L、酪蛋白酶4.0mg/L；調節pH值為5.8～6.0。

本發明所述一種金銀花組織培養及其培養基制備，其有益效果在于：不受季節和氣候的影響，因而，非常適合于全年批量大規模生產金銀花的種苗；本方法從外植體上經愈傷組織階段產生金銀花的試管苗，因而既省工又易于操作，還可有效地避免由愈傷組織產生的變異的不足。

具體實施方式

以下實例為本發明作進一步闡述。

實施例1

一、外植體的選取與處理：首先選取金銀花葉片，葉片先用0.1％的洗滌精溶液小心洗凈后，自來水沖洗25分鐘后，接著在無菌條件下，用75％酒精處理30秒，再用0.1％升汞消毒滅菌8分鐘，用無菌去離子水漂洗4次，每次漂洗5分鐘，之后，在超凈工作臺上用滅菌的醫用手術刀將葉片切成1.5～2.0cm的具葉脈的葉片外植體；