[發(fā)明專利]凝乳酶的制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110381424.3 | 申請日： | 2011-11-27 |
| 公開（公告）號： | CN102382808A | 公開（公告）日： | 2012-03-21 |
| 發(fā)明（設計）人： | 甘伯中;高維東;紀銀莉;宋禮;何瀟;張玉平;唐興宇 | 申請（專利權(quán)）人： | 甘肅華羚生物技術研究中心;甘肅農(nóng)業(yè)大學 |
| 主分類號： | C12N9/58 | 分類號： | C12N9/58;C12R1/645 |
| 代理公司： | 蘭州振華專利代理有限責任公司 62102 | 代理人： | 張真 |
| 地址： | 730000 *** | 國省代碼： | 甘肅;62 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 凝乳 制備 方法 | ||
1.?一種凝乳酶的制備方法，其特征是包括以下步驟：
（1）米黑毛霉菌株:購自ATCC美國模式培養(yǎng)物集存庫，菌種編號NO.26282?Rhizomucor?miehei；
（2）制備液體菌種：稱取20-40g的麩皮煮沸8-12分鐘，用四層紗布過濾，濾液用水定容至1000mL,取250mL裝進500mL三角瓶，棉塞封口，121℃滅菌20分鐘；冷卻后，接種1環(huán)米黑毛霉孢子，33℃培養(yǎng)2天；
（3）液體菌種接種麩皮培養(yǎng)基：175g麩皮，加入150-210mL水，攪拌均勻，121℃滅菌25分鐘，冷卻后，接種液體種子，接種量20-60mL，25℃-50℃培養(yǎng)3天；
（4）浸提：1公斤發(fā)酵產(chǎn)物加入9%的氯化鈉水溶液20升，室溫浸提4?-12小時；
（5）離心：用80-150目濾布的板框壓濾，過濾液用離心機8000-10000rpm轉(zhuǎn)速離心，收集上清液，即為粗酶液。
2.如權(quán)利要求1所述的凝乳酶的制備方法，其特征是還包括以下步驟：
（6）超濾：取10升離心液，通過截留量為8k-10k的超濾膜，廢棄透析液，當酶液體積為1升-2升，停止超濾，濃縮比例5-10倍；
（7）干燥：1升超濾液添加氯化鈉50-100g，甘露醇30-60g，真空冷凍干燥72小時，得凝乳酶成品。
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