[發明專利]一種兩歧雙歧桿菌抗凍培養基及其應用方法

有效

• 申請號: 201110376845.7
• 申請日: 2011-11-23
• 公開（公告）號: CN102408993A
• 公開（公告）日: 2012-04-11
• 發明（設計）人: 舒國偉;馬振興;陳合;馬齊;秦濤;張華;雷小蘭
• 申請（專利權）人: 陜西農產品加工技術研究院
• 主分類號: C12N1/04
• 分類號: C12N1/04;C12R1/01
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 陸萬壽

1.一種兩歧雙歧桿菌抗凍培養基，其特征在于：該抗凍培養基的配方組成包括以下組分：16-20g乳糖、3-5g酵母提取物、6-9g氯化鈉、0.6-1.0g山梨醇、0.2-0.5g谷氨酸，8-12g大豆蛋白胨、0.5-2.0g檸檬酸氫二銨、0.2-0.5g甜菜堿、1.0-2.5g磷酸氫二鉀、0.4-0.8g抗壞血酸鈉、0.1-0.2g?MgSO₄、0.5-1.0ml吐溫80、3-5g半胱氨酸鹽酸鹽和1000ml蒸餾水。

2.根據權利要求1所述一種兩歧雙歧桿菌抗凍培養基，其特征在于：所述抗凍培養基的配方組成包括以下組分：18g乳糖、4g酵母提取物、7g氯化鈉、0.6g山梨醇、0.3g谷氨酸，10g大豆蛋白胨、1.5g檸檬酸氫二銨、0.3g甜菜堿、2.0g磷酸氫二鉀、0.5g抗壞血酸鈉、0.15g?MgSO₄、1.0ml吐溫80、4g半胱氨酸鹽酸鹽和1000ml蒸餾水。

3.根據權利要求1所述一種兩歧雙歧桿菌抗凍培養基，其特征在于：所述抗凍培養基的配方組成包括以下組分：20g乳糖、5g酵母提取物、6g氯化鈉、0.8g山梨醇、0.4g谷氨酸，8g大豆蛋白胨、2.0g檸檬酸氫二銨、0.5g甜菜堿、1.0g磷酸氫二鉀、0.8g抗壞血酸鈉、0.2g?MgSO₄、1.0ml吐溫80、3.5g半胱氨酸鹽酸鹽和1000ml蒸餾水。

4.根據權利要求1、2或3所述一種兩歧雙歧桿菌抗凍培養基，其特征在于：所述抗凍培養基的制備方法，包括以下步驟：

(1)將稱取的乳糖、酵母提取物、氯化鈉、大豆蛋白胨、檸檬酸氫二銨、磷酸氫二鉀、MgSO₄和吐溫80溶解于950mL蒸餾水中，加熱溶解，調節pH至6.2-6.8，然后在118-121℃滅菌15-20min，滅菌后冷卻至室溫得培養基A；

(2)將稱取的抗壞血酸鈉、山梨醇、谷氨酸、半胱氨酸鹽酸鹽及甜菜堿溶解于50ml蒸餾水中，然后用0.22μm濾膜過濾除菌得濾液；

(3)將濾液與培養基A混合均勻，即得兩歧雙歧桿菌抗凍培養基。

5.一種如權利要求1所述兩歧雙歧桿菌抗凍培養基的應用方法，包括以下步驟：

將兩歧雙歧桿菌活化后按4％的接種量接入抗凍培養基中于37℃培養16-18h，然后7000r/min離心10-15min，得兩歧雙歧桿菌菌泥，向菌泥中加入pH6.8的磷酸緩沖液，每克菌泥中加入1ml磷酸緩沖液，混合均勻后于-40℃預凍3-12h，然后放入凍干機于-56℃、4-6Pa下進行冷凍干燥18-24h，即得兩歧雙歧桿菌菌粉。