[發明專利]一種生二素鏈霉菌及其應用

有效

• 申請號: 201110375346.6
• 申請日: 2011-11-23
• 公開（公告）號: CN103131644A
• 公開（公告）日: 2013-06-05
• 發明（設計）人: 鮑娟;羅敏玉;阮林高;楊志鈞;符浩;夏興;楊天
• 申請（專利權）人: 上海來益生物藥物研究開發中心有限責任公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P21/04;C12R1/465
• 代理公司: 上海華工專利事務所 31104
• 代理人: 應云平

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，具體涉及一種新的生二素鏈霉菌(Streptomyces?ambofaciens)及其應用。

背景技術

siamycin?II是由鏈霉菌屬菌株AA3891(ATCC55286)生產的多肽抗生素，對枯草桿菌、微球菌、金黃色葡萄球菌(包括MASA)具有較強的抗菌活性，另外，對HIV和HSV病毒也有較強的活性，ID50分別為9和27μg/ml。其結構式如圖1所示，化學式為C₉₈H₁₃₃N₂₃O₂₆S₄，分子量為2177。siamycin?II為白色粉末，可溶于二甲亞砜和甲醇，微溶于堿性水，但在乙酸乙酯、氯仿和水中幾乎不可溶。硫酸反應呈陽性，茚三酮和Sakaguchi測試呈陰性。

根據文獻報道，鏈霉菌AA3891(ATCC55286)發酵生產siamycin?II的培養基組分如下：soluble?starch?2％，glucose?1％，Pharmamedia?1％，Brewer’s?yeast?extract?0.3％，NZ-amine?0.3％，Allophane?0.5％和CaCO₃?0.3％，pH?7.0。在28℃，200rpm的條件下培養112小時后，培養上清用n-丁醇抽提后真空濃縮。濃縮固體用Diaion?HP-20(40mm?i.d.×300mm)進行柱純化，首先用30％甲醇水溶液洗柱，然后用80％甲醇水溶液洗脫。在洗脫過程中進行合胞體抑制分析(SIA)檢測，具有活性的洗脫樣品經蒸發獲得siamycin?II。

發明內容

本發明的發明人分離得到了一株菌株，命名為HCCB10327，經鑒定其為鏈霉菌屬的生二素鏈霉菌(Streptomyces?ambofaciens)。進一步的研究發現，該菌株能夠發酵生產siamycin?II。

因此，本發明的首要目的就在于，提供一種生二素鏈霉菌(Streptomycesambofaciens)HCCB10327。

本發明的另一個目的在于，提供所述生二素鏈霉菌(Streptomyces?ambofaciens)的應用。

根據本發明，所述生二素鏈霉菌(Streptomyces?ambofaciens)HCCB10327的保藏號為CGMCC?No.5411。

根據本發明，所述生二素鏈霉菌(Streptomyces?ambofaciens)HCCB10327可用于通過發酵制備siamycin?II。

根據本發明，所述生二素鏈霉菌(Streptomyces?ambofaciens)HCCB10327的發酵的種子培養條件如下：

在28℃下培養40～48小時；

種子培養基組成：葡萄糖1％，玉米淀粉2％，酵母提取物0.5％，酶水解酪素0.5％，碳酸鈣0.0002％，pH?7.1。

根據本發明，所述生二素鏈霉菌(Streptomyces?ambofaciens)HCCB10327發酵的發酵培養條件如下：

在28℃下培養115～120小時；

發酵培養基組成：葡萄糖2％，可溶性淀粉3％，玉米漿粉1％，黃豆餅粉(熱)1％，胰蛋白胨0.5％，氯化鈉0.3％，碳酸鈣0.5％，谷氨酸鈉0.2％。

根據本發明，所述siamycin?II的制備還包括將發酵液經大孔樹脂吸附和制備型HPLC分離的步驟。

本發明的生二素鏈霉菌(Streptomyces?ambofaciens)能夠發酵生產siamycin?II，從而為siamycin?II的生產開辟了一條新的途徑。

附圖說明

圖1是siamycin?II的結構示意圖。

圖2是生二素鏈霉菌(Streptomyces?ambofaciens)HCCB10327的系統進化樹分析結果圖。

圖3是siamycin?II純品的MS分析結果圖。

圖4是siamycin?II的氨基酸分析結果圖。

圖5是siamycin?II的核磁共振H譜分析結果圖。

本發明的生二素鏈霉菌(Streptomyces?ambofaciens)HCCB10327已提交中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)保藏，保藏日期2011年10月28日，保藏號為CGMCC?No.5411。

具體實施方式