[發明專利]一株阿特拉津降解菌

無效

• 申請號: 201110371730.9
• 申請日: 2011-11-21
• 公開（公告）號: CN102492637A
• 公開（公告）日: 2012-06-13
• 發明（設計）人: 張穎;王志剛;汪洋;郭火生;孟東芳;姜召;曹博
• 申請（專利權）人: 東北農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A62D3/02;B09C1/10;C12R1/01;A62D101/04;A62D101/26
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 金永煥

技術領域

本發明涉及一株降解菌。

背景技術

除草劑是保證農業的重要生產資料，給人類帶來了巨大的經濟效益的同時也由于除草劑的長殘留、具有生物毒性等特點，一旦進入土壤、空氣和水體后，也給各生態環境帶來了嚴重污染。微生物修復技術被視為最有效的修復手段。

阿特拉津被列為使用最廣泛的除草劑之一，在我國華北和東北地區，阿特拉津及與其他農藥的混劑仍作為玉米田最主要的除草劑。目前，分離到的降解阿特拉津的微生物主要包括細菌、真菌、藻類、放線菌等。細菌由于其生化的多樣性和很強的適應能力，在降解阿特拉津的微生物中占有重要地位。降解阿特拉津的細菌主要有：紅球菌、假單胞菌、土壤桿菌、不動桿菌、根瘤細菌等。

Singh等人曾在2004年報道從被阿特拉津深度污染的土壤中分離得到多株阿特拉津降解菌，經鑒定屬于不動桿菌屬。分離篩選出其中一株菌A₆，通過對其生理特性的研究發現，該菌最適的生長條件為溫度37℃，pH在7到8之間，并且阿特拉津是被作為碳源利用的。在此之前以及之后，關于不動桿菌屬降解阿特拉津的報道很少。

在修復過程中，實際溫度不能夠達到其要求，而且耗能較大；其最適生長條件pH在堿性范圍，在酸性環境下生長受到抑制，使得其應用范圍受到限制；菌株的培養基成分成本高，不適合實際應用修復。

發明內容

本發明提供了一株阿特拉津降解菌；解決了目前無法在低溫條件下高效降解阿特拉津的問題。

一株阿特拉津降解菌，它為不動桿菌(Acinetobacter?sp.)DNS32，已在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏地址為北京市朝陽區北辰路1號院3號.中國科學院微生物研究所，保藏編號為CGMCC?NO.5365，保藏日期為2011年10月21日；它為革蘭氏陰性菌，單個細胞呈桿狀，菌體長為2.03μm，寬為646nm；菌落呈乳白色略帶黃色，不透明，邊緣圓整，表面光滑，有光澤，略有隆起。

本發明中一株阿特拉津降解菌，它為不動桿菌(Acinetobacter?sp.)DNS32，其明膠液化試驗呈陽性、硝酸鹽還原試驗呈陽性、檸檬酸鹽利用試驗呈陰性、硫化氫產生試驗呈陽性、MR試驗呈陽性、VP試驗呈陽性、接觸酶試驗呈陽性、淀粉水解試驗呈陽性、葡萄糖試驗呈陽性、蔗糖試驗呈陽性、甘油試驗呈陰性；該菌的生長溫度為25～30℃，最適生長溫度為30℃，生長pH值為6.5～7.5，最適生長pH值為7.2。

本發明一株阿特拉津降解菌，它為不動桿菌(Acinetobacter?sp.)DNS32，經16S?rDNA序列測序，結果在NCBI上進行同源性比較，菌株DNS32與Acinetobacter?lwoffii?DSM?2403的親緣關系最近，同源性達99％以上。

本發明一株阿特拉津降解菌，它為不動桿菌(Acinetobacter?sp.)DNS32，已在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏地址為北京市朝陽區北辰路1號院3號.中國科學院微生物研究所，保藏編號為CGMCC?NO.5365，保藏日期為2011年10月21日。

本發明中的阿特拉津降解菌，它為不動桿菌(Acinetobacter?sp.)DNS32，具有高效降解阿特拉津的能力，36小時降解率可達95.88％，國內外未見報道；菌株DNS32的最適溫度范圍為25-30℃，比已報道菌株低5-10℃；菌株DNS32對鹽分的耐受能力較強，鹽度為1-4％條件下36小時降解率均高于60％，優于已報道的其它同功能菌株，適用于高鹽分環境阿特拉津污染的修復。

附圖說明

圖1為具體實施方式一中菌株DNS32的掃描電子顯微鏡圖；

圖2為具體實施方式一中菌株DNS32的系統發育樹；

圖3為具體實施方式一中菌株DNS32在鹽分濃度影響下的生長和降解情況的曲線圖，其中▲表示降解曲線，◆表示生長曲線；

圖4為具體實施方式一中菌株DNS32在不同阿特拉津濃度影響下的生長和降解情況的曲線圖，其中▲表示降解曲線，◆表示生長曲線；

圖5為具體實施方式一中菌株DNS32在不同溫度下的生長和降解情況的圖，其中口表示降解曲線，◆表示生長曲線；

圖6為具體實施方式一中菌株DNS32在不同外加氮源影響下的降解情況的圖，其中口表示降解情況；

圖7為具體實施方式一中菌株DNS32在實際修復污染土壤中各時間點阿特拉津降解情況的圖，其中◆表示AT(阿特拉津)自然降解，▲表示AT+DNS32。