[發明專利]一種阿特拉津降解菌DNS32的發酵培養基

有效

• 申請號: 201110371685.7
• 申請日: 2011-11-21
• 公開（公告）號: CN102391971A
• 公開（公告）日: 2012-03-28
• 發明（設計）人: 張穎;王志剛;汪洋;郭火生;孟東芳;姜召;曹博
• 申請（專利權）人: 東北農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 金永煥

技術領域

本發明涉及一種發酵培養基。

背景技術

除草劑是保證農業的重要生產資料，給人類帶來了巨大的經濟效益的同時也由于除草劑的長殘留、具有生物毒性等特點，一旦進入土壤、空氣和水體后，也給各生態環境帶來了嚴重污染。微生物修復技術被視為最有效的修復手段。

阿特拉津降解菌，它為不動桿菌(Acinetobacter?sp.)DNS32，可稱為阿特拉津降解菌DNS32，該菌已在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏地址為北京市朝陽區北辰路1號院3號.中國科學院微生物研究所，保藏編號為CGMCC?NO.5365，保藏日期為2011年10月21日；該菌實際在土壤中降解率可達88.97％。

目前，用于培養阿特拉津降解菌的培養基主要有無機鹽培養基包括兩種方式以阿特拉津為氮源和以阿特拉津為碳源利用，除此之外還有LB培養基和牛肉膏蛋白胨培養基。阿特拉津降解菌DNS32經試驗驗證，結果表明阿特拉津降解菌DNS32是以阿特拉津為氮源被利用的。

通常使用的無機鹽培養基和LB培養基配方如下：

無機鹽培養基由3g的葡萄糖、1.6g的K₂HPO₄、0.4g的KH₂PO₄、0.2g的MgSO₄、0.4g的NaCl、0.1g的阿特拉津粉末和1000mL的蒸餾水組成；

LB培養基由5g的酵母膏、10g的蛋白胨、10g的NaCl和1000mL蒸餾水組成；

牛肉膏蛋白胨由3g的牛肉膏、10g的蛋白胨、5gNaCl和1000mL的蒸餾水組成。

根據市場價格配制1L無機鹽培養需要0.67元費用，從其產生的活菌生物量成本方面看，每生產100億個菌落需花費0.16元；配制1L?LB培養基需要4.05元的費用，每生產100億個菌落需花費0.81元；配制1L牛肉膏蛋白胨培養基需要3.75元，每生產100億個菌落需花費0.75元。

由此可見，無機鹽培養基培養雖然成本較低，但是培養時間長，一般需要三到四天，不適合實際生產應用；LB培養基和牛肉膏蛋白胨培養基是實驗室中常用來快速生產微生物的營養基，但是由于其成本過高，很難在實際發酵生產菌株中使用。

發明內容

本發明目的是為了解決現有培養阿特拉津降解菌的培養基存在成本高、發酵后生物量低及不適合于發酵培養阿特拉津降解菌DNS32的問題，而提供了一種阿特拉津降解菌DNS32的發酵培養基。

阿特拉津降解菌DNS32的發酵培養基由39.49g的玉米粉、25.64g的豆餅粉、3g的CaCO₃、3.27g的K₂HPO₄、0.2g的MgSO₄·7H₂O、0.2g的NaCl和1000mL的蒸餾水組成。

本發明中阿特拉津降解菌DNS32的發酵培養基，是專門針對阿特拉津降解菌DNS32而設計的，其主要基質北方地區玉米粉和豆餅粉是廉價的農副產品，容易獲取，不需要深加工等優點，因此極大地降低了阿特拉津降解菌DNS32發酵培養基的成本；CaCO₃可以穩定發酵液酸堿平衡，其他營養物質都是微生物生長所需要的。發酵周期短，培養時間為24小時。

本發明中阿特拉津降解菌DNS32經發酵培養發酵生物量高達7.194×10⁸CFU/mL，比優化前提高了31.2％；配制1L阿特拉津降解菌DNS32的發酵培養基需要0.27元，比無機鹽培養基成本降低了40.71％，與LB培養基和牛肉膏蛋白胨培養基相比，成本都大幅度降低分別為93.16％和92.62％。從生物量成本上看，阿特拉津降解菌DNS32的發酵培養基每生產100億個菌落的費用為0.038元，比無機鹽培養降低了75.75％，比LB培養基和牛肉膏蛋白胨培養基降低了95.25％和94.87％。

附圖說明

圖1為具體實施方式一的實驗中實際生物量與預測生物量比較圖，“□”表示以實際生物量為X坐標，預測生物量為Y坐標作圖得到各點，“-”表示以各點為基礎所得到的趨勢線，其相關系數為95.84％。

具體實施方式

本發明技術方案不局限于以下所列舉具體實施方式，還包括各具體實施方式間的任意組合。