[發(fā)明專利]黃芩素在制備治療肺炎藥物中的應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110370720.3
• 申請日: 2011-11-21
• 公開（公告）號: CN102429899A
• 公開（公告）日: 2012-05-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄧旭明;邱家章;牛效迪;董靖
• 申請（專利權(quán)）人: 吉林大學
• 主分類號: A61K31/352
• 分類號: A61K31/352;A61P11/00;A61P29/00;A61P31/04;A61P31/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及黃芩素在制備治療肺炎藥物中的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。

一、背景技術(shù)

黃芩素(Baicalein)是從高黃芩葉、木蝴蝶的種子和莖皮中提取分離出來的一種黃酮類化合物，具有明顯的抗菌活性，對痢疾桿菌、白喉桿菌、綠膿桿菌、葡萄球菌、鏈球菌、肺炎雙球菌以及腦膜炎球菌等均有抑制作用，最低抑菌濃度(MIC)在32-64μg/ml之間。但目前為止國內(nèi)外未見黃芩素用于治療細菌性肺炎報道。

細菌性肺炎是由肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、化膿性鏈球菌、軍團菌等感染所引起的疾病，該病在兒童、老年人和免疫缺陷患者中病死率極高。近年來，抗生素的大量使用導致細菌耐藥率增高，使得細菌性肺炎的治療面臨無藥可治的局面。目前臨床上以金黃色葡萄球菌所導致的肺炎病情較為嚴重，尤其是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)引起的肺炎病死率仍然較高。目前治療金黃色葡萄球菌肺炎的藥物通常使用苯唑西林和氯唑西林，但由于MRSA的出現(xiàn)，常常會導致治療失敗。因此，尋找新型、安全的治療藥物迫在眉睫。黃芩素是來源于我國傳統(tǒng)中藥材黃芩、木蝴蝶等的成分，本發(fā)明研究證實了黃芩素對細菌性肺炎，尤其是耐藥性金黃色葡萄球菌引起的肺炎具有較好的治療效果。

二、發(fā)明內(nèi)容

黃芩素的分子結(jié)構(gòu)如下：

本發(fā)明通過兔紅細胞溶血試驗、人肺上皮細胞(A549)損傷的保護試驗以及小鼠金葡菌肺炎模型證實其治療金葡菌感染作用。

三、具體實施方式

1.溶血試驗

純化的α-溶血素于96孔板中作連續(xù)的二倍稀釋，每個孔中加入10⁷個兔紅細胞，于37℃中孵育30min后離心。使紅細胞溶解的最高稀釋倍數(shù)視為溶血滴度(Hemolysis?titre)。

不加黃芩素和加入不同濃度的黃芩素后α-溶血素的溶血滴度如下表1：

表1.黃芩素對α-溶血素溶血活性的抑制作用

黃芩素(μg/ml)?溶血滴度(Hemolysis?titre)??0??2048??32??32??16??128??8??256??4??1024

2.人肺上皮細胞(A549)損傷的保護試驗

金葡菌NCTC?8325-4于TSB培養(yǎng)基中培養(yǎng)至OD_600nm＝0.5，取5ml的細菌培養(yǎng)物，離心并重懸于10ml的F12K培養(yǎng)基中。A549細胞于F12K培養(yǎng)基(加入10％胎牛血清)中于37℃，5％CO₂培養(yǎng)24小時后，以1.5×10¹個細胞/孔鋪于96孔細胞培養(yǎng)板中，每孔100μl。細胞貼壁后，加入100μl金葡菌懸液，并加入不同濃度的黃芩素，置于細胞培養(yǎng)箱中于37℃，5％CO₂共培養(yǎng)8h。加入live(green)/dead(red)試劑，后于激光共聚焦顯微鏡(LSCM)下觀察A549細胞的狀態(tài)，活細胞顯綠色，死細胞顯紅色。

結(jié)果表明，黃芩素能夠保護金葡菌α-溶血素介導的人肺上皮細胞(A549)損傷，該作用呈現(xiàn)劑量依賴性。

3.小鼠金葡菌肺炎的實驗治療學研究

3.1小鼠金葡菌肺炎模型