[發(fā)明專利]一株殺線蟲的綠僵菌及其應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110369995.5
• 申請日: 2011-11-18
• 公開（公告）號: CN102382775A
• 公開（公告）日: 2012-03-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉杏忠;向梅春;李鋒;段維軍;劉建斌
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院微生物研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01P5/00;C12R1/645
• 代理公司: 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;任鳳華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一株殺線蟲的綠僵菌及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

蔬菜根結(jié)線蟲病是世界性病害，其病原物為根結(jié)線蟲(Meloidogyne?spp.)，分類上屬于異皮科根結(jié)線蟲屬。迄今已報道的根結(jié)線蟲達80余種，主要種類有南方根結(jié)線蟲、瓜哇根結(jié)線蟲、花生根結(jié)線蟲和北方根結(jié)線蟲。根結(jié)線蟲通常沒有明顯的寄主專化性，能夠侵染的植物超過3000種，分屬114科，包括單子葉植物，雙子葉植物，草本植物和木本植物，對大多數(shù)的糧食作物、油料作物、纖維作物、煙草、茶葉、果樹、蔬菜、藥材和花卉等均可造成嚴重損失。受其危害后，作物品質(zhì)下降，大幅度減產(chǎn)，甚至絕產(chǎn)，同時線蟲病的發(fā)生又加劇了枯萎病、黃萎病和立枯病等土傳病害的危害，造成植物抵抗能力下降，極易受其它病原物侵染。病害發(fā)生時，一般每年造成10％-15％的經(jīng)濟損失，發(fā)病嚴重的時候損失可達30％-40％，甚至絕產(chǎn)。據(jù)不完全統(tǒng)計，全世界每年因根結(jié)線蟲危害所造成的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟損失達1000億美元以上。據(jù)預(yù)測，未來10年線蟲的發(fā)生會有明顯的上升，年平均增幅約1％-9％，長期連作使得土壤根結(jié)線蟲累積為害尤為嚴重，因此在未來相當(dāng)長的時間內(nèi)根結(jié)線蟲病依然是農(nóng)作物的主要病害之一。

目前，對于根結(jié)線蟲的防治，主要以化學(xué)藥劑防治為主，以及抗線蟲品種和輪作等其它方法。這些方法雖然對線蟲防治有一定作用，但都存在著一些弊端。在控制該類病害的方法中，由于根結(jié)線蟲通常存活于土壤中和植物根內(nèi)，所以一般化學(xué)農(nóng)藥難以控制其危害，因此該類病害成為大量劇毒農(nóng)藥頻繁使用的對象，對農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)的安全性構(gòu)成嚴重威脅。同時，由于化學(xué)殺線蟲劑只能在短期內(nèi)控制線蟲數(shù)量，同時還存在成本高、持效短和抗藥性等問題；抗性品種的選擇作用會使線蟲的群體發(fā)生變化，最后逐漸喪失抗性；而輪作防治根結(jié)線蟲不適合現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的要求等。綜上所述，由于目前缺乏實用、高效、可持續(xù)的治理技術(shù)，根結(jié)線蟲病發(fā)生區(qū)域不斷擴大，危害作物種類持續(xù)增加，致使農(nóng)業(yè)生產(chǎn)面臨嚴峻挑戰(zhàn)，殺線蟲生物農(nóng)藥具有非常廣闊的應(yīng)用價值和市場前景。

安全、有效的防治根結(jié)線蟲類病害是目前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上亟待解決的緊迫問題，而現(xiàn)有的化學(xué)防治等措施并不能滿足這一要求，現(xiàn)在生物制劑面臨到如下問題：

1.定植問題。實際應(yīng)用過程中，菌株在土壤中的定植能力差，防治效果達不到要求。

2.穩(wěn)定性問題。制劑活力喪失十分迅速，導(dǎo)致生防制劑貨架期短，難以商業(yè)化生產(chǎn)。為了保證制劑具有較長時間的貨架期，往往要求嚴格的保存條件，直接限制了真菌類生物農(nóng)藥的大規(guī)模應(yīng)用。

綜上所述，高效生防菌株以及穩(wěn)定劑型的開發(fā)是植物寄生線蟲病害生物防治工作重要方向。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一株綠僵菌(Metarhizium?anisopliae?var.anisopliae)HYN-1-2。

本發(fā)明所提供的綠僵菌(Metarhizium?anisopliae?var.anisopliae)HYN-1-2，在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的登記入冊編號為CGMCC?No.5433，該綠僵菌具有高效防治根結(jié)線蟲的功能。

該綠僵菌(Metarhizium?anisopliae?var.anisopliae)HYN-1-2?CGMCC?No.5433具有以下特征：

在PDA和SMAY培養(yǎng)基上20-25℃下生長7天，菌落直徑35mm，14天達50mm。在查氏培養(yǎng)基上菌落擴張較慢。菌落質(zhì)地絨毛狀至棉絮狀，初為白色，產(chǎn)孢后變?yōu)樯罹G色至墨綠色，背面棕黃色，菌落表面常因分生孢子粘聚而呈厚苔樣。分生孢子梗不形成分生孢子座，直徑2.2-3.1μm。分生孢子單細胞，長橢圓形，表面光滑，脫落后聚集成孢子團5.6-8.4μm～2.5-3.2μm；最佳生長溫度為25-30℃。

本發(fā)明的另一個目的是提供一種綠僵菌制劑，所述制劑的活性成分為綠僵菌(Metarhizium?anisopliae?var.anisopliae)HYN-1-2?CGMCC?No.5433，在所述制劑中的含量為10⁷-10⁹cfu/克。

所述制劑為微球型制劑，所述微球型制劑的單粒微球重為0.032-0.034克，粒徑為4.2-4.8mm。

本發(fā)明所提供的綠僵菌(Metarhizium?anisopliae?var.anisopliae)HYN-1-2CGMCC?No.5433或所述制劑可用于防治植物根結(jié)線蟲。