[發明專利]去氫克林霉素、其分析制備方法和用途

有效

• 申請號: 201110369607.3
• 申請日: 2011-11-18
• 公開（公告）號: CN103122013A
• 公開（公告）日: 2013-05-29
• 發明（設計）人: 李悅;孫秋實;吳彤
• 申請（專利權）人: 上海醫藥工業研究院;中國醫藥工業研究總院
• 主分類號: C07H15/16
• 分類號: C07H15/16;C07H1/06;A61K31/7056;A61P31/04;G01N30/88
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 陳長會;謝燕軍

1.去氫克林霉素，具有如下式III所示結構：

2.如權利要求1所述的去氫克林霉素的分析制備方法，其特征在于對克林霉素原料進行分析，并從中分離制備所述克林霉素異構體，包括下列步驟：

a)用LC-MS法測定所述克林霉素原料，根據被分析成分的相對保留時間和/或分子量確定所述原料中的去氫克林霉素；

b)根據步驟a)中所述的去氫克林霉素的相對保留時間和/或分子量確定柱層析法的條件，使用正相硅膠柱層析法富集該相對保留時間和/或分子量對應的被分析成分；

c)根據步驟a)中所述的去氫克林霉素的相對保留時間所顯示的色譜保留行為確定制備液相法的條件，用制備液相法收集所述保留時間相對應的被分析成分。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟a)中，所述的LC-MS法測定所采用HPLC條件為：

流動相18％乙腈、3％四氫呋喃、79％水和0.2％甲酸；

pH氨水調至5.43-5.47；

柱溫25℃；

流速1.0ml/min；

檢測波長210nm；

色譜柱Diamonsil?ODS?C18，5μm，250×4.6mm柱。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟b)中，所述的正相硅膠柱層析法富集采用的固定相為100～200目硅膠，流動相為乙酸乙酯和水飽和甲醇混合溶劑。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟b)包括：

b?1)樣品∶硅膠＝1∶50，將樣品溶于甲醇中，干法上柱；

b2)使用體積比為9∶1的乙酸乙酯∶甲醇混合溶劑洗脫并收集洗脫液。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟c)中，所述的制備液相法所采用條件包括：

流動相：18％乙腈，4.5％四氫呋喃，77.5％水，0.2％甲酸；

氨水調pH值為5.45左右；

色譜柱：Agilent?ZORBAX?SB-C18(5μm，9.4×250mm)；檢測波長：210nm；流速：1.0×2.25mL/min；

收集保留時間為41.080處的峰相對應的被分析物。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，對所得被分析物進行純化，條件如下：儀器：HP1100，配有Waters?2695?Separation?Module，Waters?2487?DualλAbsorbance?Detector?Waters；檢測波長：210nm；流速：1.5mL/min；柱溫：35℃；流動相：25％乙腈，3％四氫呋喃，72％水，0.2％甲酸，氨水調pH為5.19左右。

8.如權利要求1所述的去氫克林霉素在制備抗革蘭氏陽性菌藥物中的用途。

9.如權利要求8所述用途，其中所述革蘭氏陽性菌選自抗枯草桿菌或金黃色葡萄球菌。

10.根據權利要求2-7中任一項所述方法制備的雜質標準品，其特征在于，所述雜質具有如下結構式III：

11.根據權利要求10所述的雜質標準品在分析克林霉素原料中的用途。