[發明專利]梭菌AUH-JLC140及其在去氧甲基安哥拉紫檀素生物合成中的應用有效
申請號: | 201110367963.1 | 申請日: | 2011-11-18 |
公開(公告)號: | CN102391969A | 公開(公告)日: | 2012-03-28 |
發明(設計)人: | 王秀伶;張志賢;李慧;周博 | 申請(專利權)人: | 河北農業大學 |
主分類號: | C12N1/20 | 分類號: | C12N1/20;C12P7/22;C12R1/145 |
代理公司: | 石家莊國為知識產權事務所 13120 | 代理人: | 米文智 |
地址: | 071001 *** | 國省代碼: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索關鍵詞: | 梭菌 auh jlc140 及其 甲基 安哥拉 紫檀 生物 合成 中的 應用 | ||
1.一種梭菌(Clostridium?sp.)AUH-JLC140,保藏號為CGMCC?No.5305。
2.根據權利要求1所述的梭菌AUH-JLC140在去氧甲基安哥拉紫檀素生物合成中的應用,其特征在于用于生物合成去氧甲基安哥拉紫檀素。
3.根據權利要求2所述的梭菌AUH-JLC140在去氧甲基安哥拉紫檀素生物合成中的應用,其特征在于在厭氧條件下能將底物黃豆苷原轉化合成去氧甲基安哥拉紫檀素,其應用方法包括下述步驟:
(1)菌株AUH-JLC140的培養
將低溫冷凍保存的梭菌AUH-JLC140融化并按15-20%接種量接種到盛有新鮮BHI液體培養基的試管中,在厭氧工作站內37oC下培養24小時;再以10%接種量將試管中的菌株AUH-JLC140重新轉接到盛有新鮮BHI液體培養基中,繼續在厭氧工作站內培養18-24小時作為種子液;
(2)底物黃豆苷原與菌株AUH-JLC140共培養及代謝產物的分離純化
①底物黃豆苷原與菌株AUH-JLC140共培養
將菌株AUH-JLC140的種子液按10-15%接種量轉接到BHI液體培養基中培養,根據黃豆苷原母液濃度為40-60毫摩爾/升及三角瓶中培養基體積,確定母液加入量,使得黃豆苷原在培養基中的濃度為0.6毫摩爾/升,?在厭氧工作站內培養3-4天,即可將底物黃豆苷原高效轉化為去氧甲基安哥拉紫檀素;
②代謝產物的分離純化
用等體積的乙酸乙酯將三角瓶內培養物萃取2次,萃取液過濾后蒸干,加入100%甲醇溶液,用制備柱在HPLC上分離制備代謝產物。
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