[發(fā)明專利]具有抗癌活性及雙光子生物顯影功能的類順鉑配合物及其制備方法

無(wú)效

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• 申請(qǐng)日: 2011-11-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102516313A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-06-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳杰穎;胡桂菊;肖陸飛;梁云科;張志文;田玉鵬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽大學(xué)
• 主分類號(hào): C07F15/00
• 分類號(hào): C07F15/00;A61P35/00;C12Q1/02;G01N21/31
• 代理公司: 安徽省合肥新安專利代理有限責(zé)任公司 34101
• 代理人: 吳啟運(yùn)

一、技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種具有抗癌活性的化合物及其制備方法，具體地說(shuō)是一種具有高的抗癌活性，且具有雙光子活體細(xì)胞顯影功能的類順鉑配合物及其合成方法。

二、背景技術(shù)

由于雙光子熒光具有激發(fā)能量低(近紅外)、光損傷小、穿透性強(qiáng)等特點(diǎn)，使得雙光子熒光顯微成像技術(shù)得到廣泛應(yīng)用。在生物學(xué)中對(duì)于細(xì)胞、基因等微觀物質(zhì)的研究通常要借助顯微鏡來(lái)觀察，但由于光線不夠強(qiáng)或放大倍數(shù)有限等原因，有時(shí)仍不易清楚的觀察，如癌細(xì)胞的裂變、DNA的復(fù)制等。如果具有雙光子吸收特性的物質(zhì)進(jìn)入活細(xì)胞，在作用部位發(fā)熒光，顯微鏡下便能清楚的看到細(xì)胞內(nèi)部的變化，且對(duì)細(xì)胞的光損傷小。

2008年Anthony?W.Parker小組報(bào)道了一種具有雙光子激發(fā)熒光且光穩(wěn)定性好的二價(jià)鉑配合物(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，2008，105，16071-16076)，通過(guò)引入與生物分子相結(jié)合的不同功能基團(tuán)，調(diào)節(jié)其在可見(jiàn)區(qū)的藍(lán)綠光到橙光之間的發(fā)光波段。由于雙光子吸收特性，一方面有效減少了對(duì)生物體的損害，另一方面在近紅外區(qū)的光對(duì)生物體有良好的穿透性和高度的空間選擇性。因此該化合物在雙光子細(xì)胞顯影方面有很好的應(yīng)用價(jià)值。同年，麻省理工大學(xué)Stephen?J.Lippard課題組報(bào)道了一種用于運(yùn)輸抗癌藥物的化合物(J.Am.Chem.Soc.2008，130，11467-11476)，化合物含有抗癌作用的順鉑部分和將化合物帶到細(xì)胞表面的葉酸衍生物長(zhǎng)鏈部分。Pt的另一端通過(guò)酰胺鍵連接到單層碳納米管上，作為一個(gè)運(yùn)輸通道，使化合物通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入到癌細(xì)胞內(nèi)部，釋放具有抗癌作用的順鉑部分。釋放出順鉑后的有機(jī)基團(tuán)在細(xì)胞內(nèi)部，可以發(fā)出熒光，因此，該化合物既具有抗癌活性同時(shí)具有生物細(xì)胞顯影作用。但是顯影基團(tuán)不具有雙光子吸收特性，對(duì)生物細(xì)胞損傷較大，而且合成較為復(fù)雜，使其應(yīng)用受到限制。

申請(qǐng)人對(duì)既具有抗癌活性、又具有雙光子生物細(xì)胞顯影功能的配合物進(jìn)行了國(guó)內(nèi)外范圍內(nèi)的檢索，結(jié)果見(jiàn)下表：

1、www.google.com網(wǎng)檢索結(jié)果：(2011/10/13)

2、中國(guó)期刊網(wǎng)檢索結(jié)果：

檢索方式一：

篇名-具有抗癌活性的類順鉑配合物雙光子吸收材料：無(wú)相關(guān)文獻(xiàn)。

篇名-具有抗癌活性及雙光子生物顯影功能的類順鉑配合物及其制備方法無(wú)相關(guān)文獻(xiàn)。檢索方式二：

全文-具有抗癌活性的類順鉑配合物雙光子吸收材料：無(wú)相關(guān)文獻(xiàn)。

全文-具有抗癌活性及雙光子生物顯影功能的類順鉑配合物及其制備方法無(wú)相關(guān)文獻(xiàn)。

由此可見(jiàn)，既具有抗癌活性、又具有雙光子生物細(xì)胞顯影功能的配合物尚未見(jiàn)報(bào)道。

三、發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供的類順鉑配合物，旨在既具有抗癌活性、又能在分子水平上直觀地研究抗癌機(jī)理。所要解決的技術(shù)問(wèn)題是賦于該配合物兼具抗癌活性和雙光子細(xì)胞生物顯影特性。

本發(fā)明類順鉑配合物的結(jié)構(gòu)式為：

本配合物的制備方法以對(duì)硝基苯胺為起始原料，包括配體和類順鉑配合物合成的化學(xué)過(guò)程以及萃取、分離、濃縮和提純等各物理過(guò)程，其特征是所述的化學(xué)過(guò)程有以下六個(gè)步驟：

1、4-硝基-(4′-乙氧基苯)苯胺(中間體M1)的合成

對(duì)硝基苯胺與對(duì)碘苯乙醚于二甲基亞砜(DMSO)溶劑中在碳酸鉀、L-脯氨酸和碘化亞銅存在條件下及氮?dú)獗Ｗo(hù)下于85-115℃攪拌反應(yīng)8-10小時(shí)，冷卻后用乙酸乙酯萃取，萃取液經(jīng)濃縮、硅膠層析柱提純和脫溶(即真空蒸出溶劑，下同)后得到橙色結(jié)晶中間體M1。以對(duì)硝基苯胺的質(zhì)量計(jì)，與碳酸鉀的質(zhì)量為1∶1.1-1.5，與L-脯氨酸的質(zhì)量比為1∶0.1-0.2，與碘化亞銅的質(zhì)量比為1∶0.05-0.1。

2、4-((4′-乙氧基苯基)(4″-硝基苯基)氨基)苯甲醛(中間體M2)的合成

中間體M1與對(duì)氟苯甲醛于DMSO溶劑中在碳酸鉀和相轉(zhuǎn)移催化劑存在條件下于85-95℃攪拌反應(yīng)70-75小時(shí)，冷卻后用乙酸乙酯萃取，萃取液經(jīng)濃縮、硅膠層析柱提純和脫溶后得到亮黃色固體中間體M2，以M1的質(zhì)量計(jì)，與碳酸鉀的質(zhì)量比為1∶0.5-0.9，與相轉(zhuǎn)移催化劑的質(zhì)量比為1∶0.05-0.09。

3、4-(4′-(二乙基氨基)-(E)-苯乙烯基)-N-(4″-乙氧基苯基)-N′-(4″′-硝基苯基)苯胺(中間體M3)的合成