[發明專利]用于消化道瘺封堵的自體生物蛋白膠試劑及其制備方法和應用有效
| 申請號： | 201110364787.6 | 申請日： | 2011-11-17 |
| 公開（公告）號： | CN103110938A | 公開（公告）日： | 2013-05-22 |
| 發明（設計）人： | 任建安;吳秀文;欒建鳳;姚根宏;顧國勝;周波;陳軍;洪之武;袁玉杰;陳鈺;黎介壽 | 申請（專利權）人： | 任建安 |
| 主分類號： | A61K38/48 | 分類號： | A61K38/48;A61L31/04;C07K14/75;C12N9/74;A61P1/00;A61K31/195;A61K33/38;A61K35/12;A61K38/36 |
| 代理公司： | 南京天華專利代理有限責任公司 32218 | 代理人： | 夏平 |
| 地址： | 210002 江蘇省南京*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 消化道 封堵 生物 蛋白 試劑 及其 制備 方法 應用 | ||
1.用于消化道瘺封堵的自體生物蛋白膠試劑，其特征在于包含如下組分：FG組分I——纖維蛋白原，1mg/ml的氨甲環酸溶液，FG組分II——凝血酶；所述的纖維蛋白原和凝血酶均由高濃度血小板血漿制備，其中所述的1mg/ml的氨甲環酸溶液與纖維蛋白原的體積比為1∶4～7。
2.根據權利要求1所述的用于消化道瘺封堵的自體生物蛋白膠試劑，其特征在于所述的高濃度血小板血漿通過如下方法制備：向全血中加入14g/100ml檸檬酸磷酸葡萄糖腺嘌呤抗凝液，23～28℃，1000g離心6-8min，分離出最上層的血漿，血漿在相同離心條件下重復離心一次，分離出最上層的血漿即為高濃度血小板血漿。
3.根據權利要求2所述的用于消化道瘺封堵的自體生物蛋白膠試劑，其特征在于所述的纖維蛋白原由所述的高濃度血小板血漿通過冷沉淀法制備得到，具體方法是：所述的高濃度血小板血漿在-80℃條件下冷凍1-6h，然后在4℃下解凍30min或至血漿全部融化，再4000rpm/min離心5min，吸出上清液，保留底部沉淀物，即得到濃縮的纖維蛋白原；所述的凝血酶通過如下方法制備：將所述的高濃度血小板血漿加入2.84mM檸檬酸中稀釋，4℃下3000g離心5min，棄去上清液，沉淀中加入CaCl2，加入NaHCO3調節PH值至中性，待凝血塊完全形成，吸出液態的凝血酶；其中所述的高濃度血小板血漿與檸檬酸溶液的體積比為1∶8～9.5；加入的CaCl2與高濃度血小板血漿的質量比為0.0005～0.001∶1。
4.根據權利要求1所述的用于消化道瘺封堵的自體生物蛋白膠試劑，其特征在于1mg/ml的氨甲環酸溶液與纖維蛋白原的體積比為1∶5。
5.根據權利要求1～4中任一項所述的用于消化道瘺封堵的自體生物蛋白膠試劑，其特征在于所述的FG組分I除纖維蛋白原，1mg/ml的氨甲環酸溶液外，還包含濃度為1×106個/ml的人脂肪干細胞。
6.根據權利要求1～4中任一項所述的用于消化道瘺封堵的自體生物蛋白膠試劑，其特征在于所述的FG組分I除纖維蛋白原，1mg/ml的氨甲環酸溶液外，還包含15nm的納米銀溶液。
7.權利要求1所述的用于消化道瘺封堵的自體生物蛋白膠試劑的制備方法，其特征在于包含如下步驟：
(1)制備高濃度血小板血漿：向全血中加入14g/100ml檸檬酸磷酸葡萄糖腺嘌呤抗凝液，23～28℃，1000g離心6-8min，分離出最上層的血漿，血漿在相同離心條件下重復離心一次，分離出最上層的血漿即為高濃度血小板血漿；
(2)制備纖維蛋白原：將步驟(1)制備的高濃度血小板血漿在-80℃條件下冷凍1-6h，然后在4℃下解凍30min或至血漿全部融化，再4000rpm/min離心5min，吸出上清液，保留底部沉淀物，即得到濃縮的纖維蛋白原；
(3)制備凝血酶：將步驟(1)制備的高濃度血小板血漿加入2.84mM檸檬酸中稀釋，4℃下3000g離心5min，棄去上清液，沉淀中加入CaCl2，加入NaHCO3調節PH值至中性，待凝血塊完全形成，吸出液態的凝血酶；其中所述的高濃度血小板血漿與檸檬酸溶液的體積比為1∶8～9.5；加入的CaCl2與高濃度血小板血漿的質量比為0.0005～0.001∶1；
(4)試劑組裝：將所述的纖維蛋白原，凝血酶，以及1mg/ml的氨甲環酸溶液分別分裝于不同容器中，-20℃保存；其中1mg/ml的氨甲環酸溶液與所述的纖維蛋白原的體積比為1∶4～7，優選1∶5。
8.根據權利要求7所述的用于消化道瘺封堵的自體生物蛋白膠試劑的制備方法，其特征在于所述的步驟(4)試劑組裝：將所述的纖維蛋白原，凝血酶，以及1mg/ml的氨甲環酸溶液，以及濃度為1×106/ml的人脂肪干細胞分別分裝于不同容器中，-20℃保存；其中1mg/ml的氨甲環酸溶液與所述的纖維蛋白原的體積比為1∶4～7，優選1∶5；或者
步驟(4)試劑組裝：將所述的纖維蛋白原，凝血酶，，1mg/ml的氨甲環酸溶液以及15nm的納米銀溶液分別分裝于不同容器中，-20℃保存；其中1mg/ml的氨甲環酸溶液與所述的纖維蛋白原的體積比為1∶4～7，優選1∶5。
9.權利要求1～6中任一項所述的用于消化道瘺封堵的自體生物蛋白膠試劑在制備治療全消化道瘺的藥物或醫療器械中的應用。
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