[發(fā)明專利]使用連續(xù)傳代的細(xì)胞系制備新城疫病毒與疫苗的方法及其制品

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110364346.6
• 申請日: 2011-11-16
• 公開（公告）號: CN102978166A
• 公開（公告）日: 2013-03-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張許科;孫進(jìn)忠
• 申請（專利權(quán)）人: 普萊柯生物工程股份有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A61K39/17;A61P31/14;C12R1/93
• 代理公司: 北京華夏正合知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11017
• 代理人: 韓登營;張煥亮

1.一種用細(xì)胞系生產(chǎn)新城疫病毒的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)細(xì)胞的培養(yǎng)：將細(xì)胞系經(jīng)消化傳代，以細(xì)胞培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，形成生長良好的細(xì)胞單層；

2)病毒接種與吸附：將新城疫病毒接種于上述生長良好的細(xì)胞單層，進(jìn)行病毒吸附；

3)細(xì)胞的孵育：換用細(xì)胞維持液培養(yǎng)后，加入300mmol/L的D-氨基葡萄糖孵育；

4)病毒的繁殖：將上述孵育劑洗去，重新加入細(xì)胞維持液培養(yǎng)細(xì)胞系以繁殖新城疫病毒；

5)病毒的收獲：收獲含有新城疫病毒的培養(yǎng)液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)中接種用的新城疫病毒是使用細(xì)胞系生產(chǎn)的新城疫病毒。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述的新城疫病毒是新城疫病毒Lasota株。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于，所述的細(xì)胞系為：MDBK細(xì)胞系、VeroE6細(xì)胞系、BHK-21細(xì)胞系、PK-15細(xì)胞系、IBRS-2細(xì)胞系的任意一種或幾種。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述的細(xì)胞系為：BHK-21細(xì)胞系。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于，所述的孵育劑為D-氨基葡萄糖、干擾素或脂多糖。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于，所述的細(xì)胞孵育時間為20-40min。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于，所述的細(xì)胞生長液的血清含量為1％-7％v/v。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于，所述的細(xì)胞維持液為無血清的細(xì)胞培養(yǎng)液。

10.一種根據(jù)權(quán)利要求1-8任意一項所述的方法制備的新城疫病毒，其特征在于，使用細(xì)胞系生產(chǎn)新城疫病毒。

11.一種用細(xì)胞系生產(chǎn)新城疫疫苗的方法，其特征在于，使用權(quán)利要求10所述的新城疫病毒，加入滅活劑，滅活后加入獸藥學(xué)上可接受的疫苗佐劑制備為新城疫疫苗。

12.一種根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法制備的新城疫疫苗，其特征在于，使用細(xì)胞系生產(chǎn)新城疫疫苗。