[發明專利]類人膠原蛋白及注射型類人膠原蛋白軟組織填充材料

有效

• 申請號: 201110363121.9
• 申請日: 2011-11-16
• 公開（公告）號: CN102492032A
• 公開（公告）日: 2012-06-13
• 發明（設計）人: 范代娣;馬曉軒;嚴建亞
• 申請（專利權）人: 陜西巨子生物技術有限公司
• 主分類號: C07K14/78
• 分類號: C07K14/78;C12N15/11;C12N15/63;C12N5/10;A61L27/46;A61L27/24;A61L27/20
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 封新琴

技術領域

本發明屬于蛋白質工程、生物醫用材料領域，具體涉及類人膠原蛋白、注射型類人膠原蛋白軟組織填充材料及其制備方法。

背景技術

整形美容行業正隨著人們生活水平的不斷提高而快速發展，隆胸、隆鼻、除皺、臉部整形等都受人追捧。目前面部整形的需求包括：祛除皺紋，改善面部輪廓，填平凹陷瘢痕或唇部，修復受傷的組織等。因此，軟組織填充材料市場需求量大。

在19世紀90年代至今，人們先后研究了白蠟、脂肪移植、硅樹脂、凝膠植入體等材料用于軟組織整形，臨床應用發現：都存在著硬化，瘤狀腫塊、吸收過快、慢性炎癥等問題。近些年來，美國FDA相繼批準了幾個用于軟組織填充的產品，其主要成分為牛膠原、透明質酸鈉、PMMA小球等，已經有了較好的效果，對于部分使用者仍然存在著使用部位紅腫、過敏及降解過快等情況。

膠原蛋白，又稱為膠原，是脊椎動物體內含量最豐富、分布最廣泛的一組硬蛋白，是脊椎動物身體結構的重要材料，也是在哺乳動物中含量最豐富的蛋白。膠原由多糖蛋白分子組成，是結締組織的主要蛋白成分，占機體總蛋白的20～30％。機體中大約一半的膠原蛋白存在于皮膚中，膠原蛋白占真皮和筋腱干重的70％，相當于體重的6％。類人膠原蛋白是將人體已知序列膠原蛋白的一段mRNA逆轉錄生成cDNA后，經過特定序列重復和修飾，轉化于大腸桿菌中，并經過高密度發酵、分離提取及純化而得，由西安巨子生物基因技術股份有限公司發明并獨家生產(中國發明專利號ZL.01106757.8)。它從根本上解決了動物提取膠原蛋白的水不溶性和病毒隱患(瘋牛病、豬瘟疫、禽流感)。

透明質酸鈉是廣泛存在于動物和人體的生理活性物質，在人皮膚、關節滑膜液、臍帶、房水及眼玻璃體中均有分布。其溶液具有高黏彈性及仿形性，是目前公認的生物相容性極好的生物醫用材料，為眼科手術的輔助劑，并有保護角膜內皮細胞及眼內組織，減少手術并發癥，促進傷口愈合的作用。

羥基磷灰石，又稱羥磷灰石，是鈣磷灰石(Ca₅(PO4)₃(OH))的自然礦物化。但是經常被寫成(Ca₁₀(PO₄)₆(OH)₂)的形式以突出它是由兩部分組成的：羥基與磷灰石。羥基磷灰石具有良好的理化性質和生物學性質，使它廣泛地應用于許多領域。羥基磷灰石作為無機材料的涂層和復合材料的無機基體的使用材料，賦予了材料良好的生物學性質和一定的機械力學性質而廣泛應用于生物材料，現在廣泛應用于人工骨等產品的開發。

發明內容

本發明的目的是提供一種注射型類人膠原蛋白軟組織填充材料及其制備方法，該材料制備工藝簡單，所制備的類人膠原蛋白軟組織填充材料穩定新好、生物相容性優異，無病毒隱患，軟組織填充及修復效果好。

本發明人經過深入研究發現：類人膠原蛋白、透明質酸鈉和羥基磷灰石均具有良好的生物相容性，三者以適當的配比進行復合，制備得到的類人膠原蛋白軟組織填充材料具有無病毒隱患、生物相容性好，可刺激手術部位細胞適量增殖等特點，具有良好的軟組織填充效果，從而完成了本發明。

即，本發明如下：

1.一種重組膠原蛋白，其由SEQ?ID?NO：1所示的氨基酸序列組成。

2.編碼項1所述的重組膠原蛋白的核酸。

3.導入了項2所述的核酸的載體。

4.用項3的載體轉化宿主細胞而得到的轉化體。

5.一種注射型類人膠原蛋白軟組織填充材料的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1)將類人膠原蛋白用注射用水溶解成質量分數為1.0％～5.0％的溶液；

2)將醫用透明質酸鈉用注射用水溶解成質量分數為0.5％～2.0％的溶液；

1)將上述兩種溶液按一定比例混合后再加入一定量的醫用級羥基磷灰石，混合攪拌，在攪拌的過程中添加適量的醫用級甘油，混合均勻后真空脫泡，得到成品。

6.根據權利要求5所述的注射型類人膠原蛋白軟組織填充材料的制備方法，其特征在于：所述類人膠原蛋白是權利要求1所述的重組膠原蛋白。

7.根據權利要求5所述的注射型類人膠原蛋白軟組織填充材料的制備方法，其特征在于：所述醫用透明質酸鈉的分子量為100萬～250萬。

8.根據權利要求5所述的注射型類人膠原蛋白軟組織填充材料的制備方法，其特征在于：所述醫用級羥基磷灰石為球形，其直徑是20～80μm。