[發明專利]反轉錄PCR分析IVF單個植入前胚胎的基因表達中的反轉錄產物PCR體系無效
| 申請號: | 201110362859.3 | 申請日: | 2011-11-14 |
| 公開(公告)號: | CN102586416A | 公開(公告)日: | 2012-07-18 |
| 發明(設計)人: | 虞強 | 申請(專利權)人: | 江蘇邁健生物科技發展有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 214000 江蘇省*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 轉錄 pcr 分析 ivf 單個 植入 胚胎 基因 表達 中的 產物 體系 | ||
1.一種反轉錄PCR分析IVF單個植入前胚胎的基因表達中的反轉錄產物PCR體系,所述分析基因表達方法包括步驟:
標本收集及純化;
反轉錄反應;
反轉錄陰性對照和陽性對照;
反轉錄產物進行實時定量PCR檢測;
使用組織細胞RNA進行優化PCR條件;
在該條件下同時放大擴增陰性對照和陽性對照;
采用相對定量的方法檢測目的基因的表達量;以及
進行統計學分析;
其中在反轉錄產物進行實時定量PCR檢測步驟中,反轉錄產物進行實時定量PCR反應體系如下:模板(cDNA)2μl,Taq?DNApolymerase?0.75IU,引物1μM,dNTPs?0.5μM,DMSO?0.05μl,Mg++2mM,熒光染料SYBR?green?0.1μl,10x?PCR緩沖液1μl,加MilliQ超純水至終體積10μl。
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