[發明專利]促進載體和插入片段連接的方法無效
| 申請號： | 201110360415.6 | 申請日： | 2011-11-15 |
| 公開（公告）號： | CN102517316A | 公開（公告）日： | 2012-06-27 |
| 發明（設計）人： | 陳惠;王德華;廖燕;吳琦;韓學易;單志;唐自鐘 | 申請（專利權）人： | 四川農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/66 | 分類號： | C12N15/66 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 611134 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 促進 載體 插入 片段 連接 方法 | ||
【權利要求書】：
1.載體和插入片段連接的方法，包括如下步驟：
(1)使用限制性內切酶處理插入片段，然后使用堿性磷酸酶處理酶切片段；
(2)使用相應的限制性內切酶處理載體；
(3)酶切載體以及堿性磷酸酶處理的插入片段通過DNA連接酶連接。
2.根據權利要求1所述的載體和插入片段連接的方法，所述的載體是pPic9K。
3.根據權利要求1所述的載體和插入片段連接的方法，所述的插入片段是來源于米曲霉蛋白酶M16家族中的金屬蛋白酶基因。
4.根據權利要求1-3任意一項所述的載體和插入片段連接的方法，步驟(1)和步驟(2)中的限制性內切酶為相同的酶，優選是EcoRI和NotI的組合。
5.根據權利要求4所述的載體和插入片段連接的方法，上述DNA連接酶是T4?DNA連接酶。
6.堿性磷酸酶處理的插入片段在促進載體和插入片段連接中的用途。
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