[發明專利]利用豬肺提取肝素鈉的方法無效
| 申請號: | 201110356975.4 | 申請日: | 2011-11-11 |
| 公開(公告)號: | CN102344502A | 公開(公告)日: | 2012-02-08 |
| 發明(設計)人: | 寧發子;楊新 | 申請(專利權)人: | 寧發子 |
| 主分類號: | C08B37/10 | 分類號: | C08B37/10;C12S3/02 |
| 代理公司: | 北京東正專利代理事務所(普通合伙) 11312 | 代理人: | 張亦華 |
| 地址: | 071000 河北省*** | 國省代碼: | 河北;13 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 利用 提取 肝素鈉 方法 | ||
1.一種利用豬肺提取肝素鈉的方法,其特征在于,采用如下步驟:
(1)取新鮮的豬肺絞碎成豬肺漿料,加入0.5-1倍重量的去離子水,再加入細胞裂解劑和防腐劑,加入量分別為豬肺漿料重量的0.1-0.2%和0.1-0.2%,在25-30℃下間歇攪拌反應4-8小時,得到豬肺漿液;
(2)在上步得到的豬肺漿液中加入1-2.5倍豬肺漿料重量的去離子水,再加入占總液體重量2.5-3.5%的氯化鈉,調pH至10-11,攪拌均勻,在25-30℃下間歇攪拌反應4-8小時,得到豬肺堿解液;
(3)將上步得到的豬肺堿解液緩慢加熱至40-45℃,調pH至8-10,加入占豬肺漿料重量0.05-0.15%的肝素鈉復合蛋白酶,攪拌均勻,保溫反應2-3小時后,緩慢加溫至50-60℃,保溫反應2-3小時,得到豬肺酶解液;
(4)將上步得到的豬肺酶解液降溫至35-37℃,補加占豬肺酶解液重量10-14%的氯化鈉,調pH至9.0-9.5,攪拌均勻,間歇攪拌反應6-8小時,得到豬肺鹽解液;
(5)將上述豬肺鹽解液加熱至80-85℃,保溫0.5-1小時,加入占豬肺鹽解液重量0.5-1.5%的復合蛋白沉淀劑,攪拌0.5-1小時,靜置后收集清液;
(6)用膜濃縮器將清液濃縮至原體積的1/20-1/10,得到濃縮液;
(7)在濃縮液中加入1-1.5倍體積的預冷乙醇,沉淀過夜后吸除乙醇,得到沉淀物,將其用無水乙醇脫水,在50-60℃下真空干燥得到肝素鈉粗品。
2.根據權利要求1所述的利用豬肺提取肝素鈉的方法,其特征在于,所述步驟(1)中細胞裂解劑由十二烷基硫酸鈉、硫代硫酸鈉、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉中任意兩種以上組成。
3.根據權利要求1所述的利用豬肺提取肝素鈉的方法,其特征在于,所述步驟(1)中防腐劑為甲苯或苯酚。
4.根據權利要求1所述的利用豬肺提取肝素鈉的方法,其特征在于,所述步驟(3)中肝素鈉復合蛋白酶由胰酶、木瓜蛋白酶、脂肪酶、2709堿性蛋白酶、1398中性蛋白酶任意兩種以上組成。
5.根據權利要求1所述的利用豬肺提取肝素鈉的方法,其特征在于,所述步驟(5)中復合蛋白沉淀劑由珍珠巖晶粉、明礬、碳酸鈣、氯化鈣、碳酸鋇中任意兩種以上組成。
6.根據權利要求1所述的利用豬肺提取肝素鈉的方法,其特征在于,所述步驟(7)中乙醇的質量百分濃度為85~90%。
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