[發明專利]一種嗜鹽曲霉菌F1及其應用

有效

• 申請號: 201110356217.2
• 申請日: 2011-11-11
• 公開（公告）號: CN102559510B
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發明（設計）人: 林秀坤;肖琳;吳寧;劉明;劉海洲;魏鑒騰;趙進;王惠;王鳳霞;郭穎
• 申請（專利權）人: 中國科學院海洋研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P17/18;C07D491/20;C12R1/66
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 周秀梅;李穎

1.一種嗜鹽曲霉菌F1，其特征在于：嗜鹽曲霉菌F1(Aspergillus?sp. F1)，保藏于中國典型培養物保藏中心(中國武漢大學內)，保藏號為： CCTCC?NO：M?2011277，保藏日期為：2011年8月4日。

2.一種按權利要求1所述的嗜鹽曲霉菌F1的應用，其特征在于：將 所述嗜鹽曲霉菌F1發酵培養于F1的液體發酵培養基中發酵培養，所得發 酵物經純化分離即得到細胞松弛素類化合物Rosellichalasin和 Cytochalasin?E。

3.按權利要求2所述的嗜鹽曲霉菌F1的應用，其特征在于：將所述 嗜鹽曲霉菌F1發酵培養于F1的液體發酵培養基中于28-30℃靜止發酵培養 25-30天所得發酵物經純化分離即得到細胞松弛素類化合物 Rosellichalasin和Cytochalasin?E。

4.按權利要求2或3所述的嗜鹽曲霉菌F1的應用，其特征在于：所述 發酵物經純化分離為將發酵培養后的發酵物的菌絲體和發酵液過濾分離， 將菌絲體用其2倍體積乙醇浸提4-5次，再用過量的乙酸乙酯萃取10-15 次，將乙酸乙酯萃取液減壓濃縮，得粗浸膏，然后采用硅膠柱層析、重結 晶和Sephadex?LH-20凝膠柱層分離純化，即分別得到Rosellichalasin和 Cytochalasin?E。

5.按權利要求4所述的嗜鹽曲霉菌F1的應用，其特征在于：將所述浸 膏用乙酸乙酯溶劑溶解后，加200-300目硅膠攪拌，減壓除去溶劑后，用 硅膠柱層析，以石油醚-乙酸乙酯為溶劑進行梯度洗脫，收集石油醚-乙酸 乙酯比例為2∶1(v/v)洗脫液，經TLC檢測收集Rf＝0.575組分，洗脫組分減 壓濃縮至干，再在正己烷-乙酸乙酯比例為1∶1(v/v)中重結晶，收集無色 針狀晶體Rosellichalasin；

或收集石油醚-乙酸乙酯比例為1∶2(v/v)洗脫液，經TLC檢測收集 Rf＝0.35組分，洗脫組分減壓濃縮至干，再在己烷-丙酮比例為1∶1中重結 晶，收集無色針狀晶體Cytochalasin?E；

將上述所得無色針狀晶體分別經Sephadex?LH-20柱層析，用甲醇洗脫， 洗脫液減壓濃縮至干，分別得白色無定形物。

6.按權利要求5所述的嗜鹽曲霉菌F1的應用，其特征在于：所述石 油醚-乙酸乙酯梯度為100∶0-0∶100(v/v)；正己烷-乙酸乙酯比例為1∶1 (v/v)；己烷-丙酮比例為1∶1(v/v)。

7.按權利要求2或3所述的嗜鹽曲霉菌F1的應用，其特征在于：所 述嗜鹽曲霉菌F1的液體發酵培養基成分為：葡萄糖2.0％(W/V)，海鹽 6.0％(W/V)，馬鈴薯200克，加適量水煮沸30分鐘，4層紗布過濾，濾液用 蒸餾水定容至1升。