[發明專利]用于發酵產丁二酸的化學合成培養基及其應用

有效

• 申請號: 201110356173.3
• 申請日: 2011-11-11
• 公開（公告）號: CN102352384A
• 公開（公告）日: 2012-02-15
• 發明（設計）人: 姜岷;奚永蘭;張九花;徐蓉;戴文宇;陳可泉;韋萍
• 申請（專利權）人: 南京工業大學
• 主分類號: C12P7/46
• 分類號: C12P7/46;C12R1/01;C12R1/19;C12R1/15
• 代理公司: 江蘇致邦律師事務所 32230
• 代理人: 樊文紅

1.一種用于發酵產丁二酸的化學合成培養基，其常規組分包含分消的碳源10～90?g/L，富馬酸二鈉?1～3?g/L，KH₂PO_4?2～4?g/L，MgCl₂·6H₂O?0.2～0.4?g/L，CaCl₂?0.2～0.4?g/L，NaCl?1～2?g/L；其特征在于還包含關鍵生長因子組分：生物素10～20?mg/L或者5-ALA?0.1～1?mg/L，煙酸25～40?mg/L，氨基酸0.87～1.2?mg/L，蛋氨酸0.11～0.22?mg/L；pH?7.0，121℃滅菌15?min。

2.根據權利要求1所述的用于發酵產丁二酸的化學合成培養基，其特征在于所述的碳源是葡萄糖、阿拉伯糖、蔗糖或秸稈經過預處理后的混合糖。

3.根據權利要求1所述的用于發酵產丁二酸的化學合成培養基，其特征在于所述的化學合成培養基的常規組分還包含中和劑，所述的中和劑是氫氧化鈉、碳酸氫鈉或氨水。

4.利用權利要求1所述的用于發酵產丁二酸的化學合成培養基制備丁二酸的方法，包括微生物菌種活化、種子培養和發酵罐培養的步驟。

5.根據根據權利要求4所述的方法，其特征在于所述的菌種活化步驟是：菌種在斜面培養基中進行平板劃線后，在37℃厭氧培養箱中活化培養24?h。

6.根據根據權利要求4所述的方法，其特征在于所述的種子培養步驟是：活化培養后的菌種轉接到種子培養基中，37℃培養10～12?h后作為種子液。

7.根據根據權利要求4所述的方法，其特征在于所述的發酵罐培養步驟是：將活化好的種子液和滅好的葡萄糖接入發酵罐中，接種量為體積比5～10?%，攪拌轉速為200?rpm，37℃發酵培養，CO₂通氣量為0.25?vvm。

8.根據根據權利要求4所述的方法，其特征在于所述的微生物是產琥珀酸放線桿菌，大腸桿菌，谷氨酸棒桿菌，或曼海姆氏產琥珀酸菌。