[發明專利]一種以1,2-丁二醇為底物生產R-α-羥基丁酸的方法有效
| 申請號: | 201110355171.2 | 申請日: | 2011-11-10 |
| 公開(公告)號: | CN103103222A | 公開(公告)日: | 2013-05-15 |
| 發明(設計)人: | 許平;高超;張文;馬翠卿 | 申請(專利權)人: | 山東大學 |
| 主分類號: | C12P7/42 | 分類號: | C12P7/42;C12R1/01 |
| 代理公司: | 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221 | 代理人: | 李健康 |
| 地址: | 250100 山*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 丁二醇 生產 羥基 丁酸 方法 | ||
1.一種以2-丁二醇為底物生產R-α-羥基丁酸的方法,步驟是:
(1)制備生物催化劑
選取氧化葡萄糖桿菌DSM?2003,常規方法培養,分離并收集菌體,用pH?7.2~7.5磷酸鉀緩沖液洗滌菌體2~4次,菌體重懸于去離子水中,使菌體濃度達到200克濕細胞/升,得到的完整細胞懸液即為生物催化劑,4℃儲存備用;
(2)轉化
將步驟(1)中制得的生物催化劑即完整細胞與底物1,2-丁二醇水溶液混合,使混合物中生物催化劑的濃度為5~120克濕細胞/升、1,2-丁二醇的濃度為5~60克/升,并加入乙二胺四乙酸二鈉至終濃度5~40毫摩爾/升;在20~50℃,pH?4.0~10.0條件下,以50~180轉/分鐘振蕩1~30小時,得到轉化液;
(3)制取含R-α-羥基丁酸溶液
將步驟(2)中制得的轉化液以5,000~10,000轉/分離心5~25分鐘,或者用200~400目濾布過濾,去除生物催化劑即完整細胞,所得清液即為含R-α-羥基丁酸溶液。
2.如權利要求1所述以1,2-丁二醇為底物生產R-α-羥基丁酸的方法,其特征在于,步驟(2)所述的1,2-丁二醇濃度為10~50克/升。
3.如權利要求1所述以1,2-丁二醇為底物生產R-α-羥基丁酸的方法,其特征在于,步驟(2)所述生物催化劑即完整細胞的濃度為40~100克濕細胞/升。
4.如權利要求1所述以1,2-丁二醇為底物生產R-α-羥基丁酸的方法,其特征在于,步驟(2)所述的乙二胺四乙酸二鈉濃度為10~30毫摩爾/升。
5.如權利要求1所述以1,2-丁二醇為底物生產R-α-羥基丁酸的方法,其特征在于,步驟(2)所述的溫度為25~40℃。
6.如權利要求1所述以1,2-丁二醇為底物生產R-α-羥基丁酸的方法,其特征在于,步驟(2)所述的pH為5.0~8.0。
7.如權利要求1所述以1,2-丁二醇為底物生產R-α-羥基丁酸的方法,其特征在于,步驟(2)所述振蕩時間為4~25小時。
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