[發明專利]一種藥物組合物注射液的質量檢測方法

有效

• 申請號: 201110354967.6
• 申請日: 2011-11-10
• 公開（公告）號: CN103105371A
• 公開（公告）日: 2013-05-15
• 發明（設計）人: 段宏泉;翁紅;張子安;李穎;楊玲
• 申請（專利權）人: 長白山制藥股份有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N30/02;G01N30/86
• 代理公司: 北京太兆天元知識產權代理有限責任公司 11108
• 代理人: 張韜

技術領域

本發明涉及一種注射液的質量檢測方法，特別涉及本發明藥物組合物注射液的指紋圖譜質量檢測方法及其注射液中總皂苷和9，10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷的含量測定方法。

背景技術

本發明藥物組合物注射液是由黃芪、人參、苦參素3味藥物組成、采用現代提取分離技術精制而成的中藥注射劑，具有益氣扶正，增強機體免疫功能的功效，在臨床上用于原發性肝癌、直腸癌、惡性淋巴瘤、婦科腫瘤以及各種原因引起的白細胞低下及減少癥和慢性乙型肝炎的治療。

高效液相色譜(HPLC)技術是構建中藥指紋圖譜主要的方法，在中藥的質量控制中發揮著重要的作用；但目前中藥指紋圖譜研究尚處于研究階段，還存在一些問題需要不斷探索，如指紋圖譜研究的規范化、標準化有待加強，由于受所用儀器、色譜柱等影響，指紋圖譜的重現性問題尚需提高，指紋圖譜分析評價方法還有待完善等。

超高效液相色譜(Ultra?Performance?Liquid?Chromatography，UPLC)色譜理論認為提高色譜柱的效能(efficiency)就能增加儀器的解析度(resolution)，而運用粒徑低于2μm的小顆粒無疑是增加效能的好方法；但減小固定相的粒度以增加色譜柱效能一直的色譜儀器科學的瓶頸，因為小顆粒不僅要求系統能承受高于目前極限壓力(比如6000psi/400bar)，需要更小的系統體積(死體積)，并且需要能適應可能只有幾秒峰寬的高速檢測器；與傳統的高效液相色譜(HPLC)相比，UPLC具有高分離度(ultra?resolution)、高速度(ultra?speed)、靈敏度(sensitivity)等優勢；目前，UPLC多應用于代謝組學分析及其他一些生化領域，在天然產物的分析方面運用也逐漸興起，因為在這些領域深入研究需要更高的分析精度。

發明內容

本發明目的在于提供一種注射液的質量檢測方法。

本發明目的是通過如下技術方案實現：

本發明藥物組合物注射液的質量檢測方法，包括如下含量測定和/或指紋圖譜檢測方法：

A?藥物組合物注射液中總皂苷成分的含量測定方法為：對照品溶液制備，精密稱取人參皂苷Rg1標準品，置于容量瓶中，甲醇溶解并定容，配制成0.98～1.10mg/ml的人參皂苷儲備溶液；精密稱取黃芪甲苷標準品，置于容量瓶中，甲醇溶解并定容，配制成1.0～1.2mg/ml的黃芪甲苷儲備溶液，將以上兩種儲備溶液按照1∶1(V/V)的比例混合，制成濃度為1.0～1.1mg/ml對照品溶液；供試品溶液制備，精密量取本發明藥物組合物注射液2～3ml，注入活化后的C18?SPE柱，依次采用水10ml，1％乙酸-水15ml，水15ml，10％甲醇-水10ml，80％甲醇-水15ml，洗脫，將80％甲醇-水洗脫部分蒸干，取甲醇適量定容于2ml容量瓶，制成供試品溶液；精密吸取供試品溶液200μL，置于試管中，氮氣吹干，加入香草醛0.2ml，高氯酸0.8ml混勻，于60℃進行顯色反應15min，加入冰醋酸5ml混勻，冰浴冷卻1min，以空白溶液作參比，在552nm波長下，測定吸光度，代入標準曲線計算總皂苷的量，即得；

B?藥物組合物注射液中9，10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷的含量測定方法為：對照品溶液制備，稱取9，10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷對照品，配制為15.0～16.5μg/ml的對照品溶液；供試品溶液制備，精密量取本發明藥物組合物注射液10ml，水浴蒸干，殘渣加入1％冰醋酸水溶液1～3ml使溶解，上C-18，500mg固相萃取柱，使用前先用無水甲醇5ml、再用5ml雙蒸水沖洗分離，以15ml?1％冰醋酸水溶液洗脫，再以10ml水洗脫，然后以10％甲醇水溶液15ml洗脫，棄去上述洗脫液，再以80％甲醇18ml溶液洗脫，收集80％甲醇洗脫液，水浴蒸干，殘渣加甲醇溶解并轉移至2ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜過濾，進樣10μL分析；液相條件：Agilent?Eclipse?XDB-C18(150×4.6mm，5μm)，流動相：以乙腈為流動相A，以水為流動相B，進行梯度洗脫：15％A(0min)，25％A(30min)，40％A(40min)，檢測波長207nm，柱溫30℃，流速0.8ml/min；精密吸取供試品溶液200μL，置于試管中，氮氣吹干，加入香草醛0.2ml，高氯酸0.8ml混勻，于60℃進行顯色反應15min，加入冰醋酸5ml混勻，冰浴冷卻1min，以空白溶液作參比，在552nm波長下，測定吸光度，代入標準曲線計算總皂苷的量，即得；