[發明專利]一種重組人干擾素α2b-CTP融合蛋白的純化方法

有效

• 申請號: 201110351260.X
• 申請日: 2011-11-09
• 公開（公告）號: CN103102417A
• 公開（公告）日: 2013-05-15
• 發明（設計）人: 劉恒;梁秋波;張秀芹;呂中華;李會成;王瑩;李鄭武;姜媛媛;孫磊;徐巖;李國軍;陳玉軍;黃宇紅;王麗娜;高晶;曹翊婕
• 申請（專利權）人: 哈藥集團技術中心
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C07K1/22;C07K1/18
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1.一種分離純化重組人干擾素α2b-CTP融合蛋白的方法,該方法可以從含有重組人干擾素α2b-CTP融合蛋白的豐收液中提取重組人干擾素α2b-CTP融合蛋白，并可以進一步將不同糖基化程度的重組人干擾素α2b-CTP融合蛋白分離,具體包含以下層析方法：

（a）藍膠染料親和層析；

（b）陽離子層析；

（c）陰離子層析。

2.根據權利要求1所述方法，其中步驟（a）的層析pH要求在5.5-8.5，優選pH7.0-8.0,洗脫鹽濃度為0.5-2M?NaCl，優選1.0-1.5?M?NaCl。

3.根據權利要求1所述方法，其中步驟（a）洗脫液要脫鹽后才能進行步驟（b）。

4.根據權利要求1所述方法，其中步驟（b）的層析pH要求在3.5-5.0，優選pH4.2-4.7,洗脫鹽濃度為0.1-0.2M?NaCl，優選0.12-0.16?M?NaCl。

5.根據權利要求1和4所述方法，其中步驟（b）所使用的層析介質包括強陽離子和弱陽離子型介質，強陽離子如SP及性質相似的任何一種介質，弱陽離子如CM及性質相似的任何一種介質。

6.根據權利要求1所述方法，其中步驟（b）所使用的層析介質包括復合型陽離子層析介質，如MMC及性質相似的任何一種介質。

7.根據權利要求1、5和6所述方法，其中步驟（b）的洗脫蛋白溶劑要置換為步驟（c）的平衡液后才可進行步驟（c）。

8.根據權利要求1所述方法，其中步驟（c）所使用的層析介質為粒徑小于40?μm的陰離子型介質，如Q?Sepharose?High?Performance、SOURCE?15Q及性質相似的任何一種介質。

9.根據權利要求1所述方法，其中步驟（c）的層析pH要求在5.0-8.0，優選pH5.5-6.5,洗脫鹽濃度范圍為0.17-1.0?M?NaCl，優選范圍為0.17-0.25?M?NaCl。