[發(fā)明專利]一種微生物轉(zhuǎn)化制備(S)-環(huán)氧氯丙烷的方法及菌株

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110350712.2
• 申請日: 2011-11-08
• 公開（公告）號: CN102533921A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄭裕國;鄒樹平;胡忠策;金火喜
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12P41/00
• 分類號: C12P41/00;C12P17/02;C12P7/18;C12N1/14;C12R1/685
• 代理公司: 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;冷紅梅

1.一種微生物轉(zhuǎn)化制備(S)-環(huán)氧氯丙烷的方法，所述方法包括：以外消旋環(huán)氧氯丙烷為底物，以黑曲霉CCTCC?NO：M?2010275發(fā)酵獲得的含酶菌體細(xì)胞為生物催化劑，在有機(jī)溶劑中進(jìn)行選擇性催化反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液經(jīng)分離純化獲得所述(S)-環(huán)氧氯丙烷；所述的有機(jī)溶劑為下列之一：環(huán)己烷、正己烷或庚烷。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述選擇性催化反應(yīng)在20～40℃、pH5～9的條件下進(jìn)行，反應(yīng)時(shí)間10～20h。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述外消旋環(huán)氧氯丙烷初始濃度為2～20g/L，所述含酶菌體細(xì)胞添加量以菌體干重計(jì)為0.5～5g/L。

4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述含酶菌體細(xì)胞經(jīng)固定化后作為生物催化劑。

5.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于所述固定化的方法如下：將經(jīng)黑曲霉CCTCC?NO：M?2010275發(fā)酵培養(yǎng)獲得的濕菌體與無菌水按質(zhì)量比1∶10～20混合，獲得菌懸液；將菌懸液以體積比1∶1～3加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)3～6％的海藻酸鈉水溶液中，攪拌均勻，獲得含有菌體的海藻酸鈉混合液，將混合液逐滴滴入質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.5～1.5％氯化鈣水溶液中，得到的固定化懸浮液，20～30℃固化5～15h，獲得含有含酶菌體細(xì)胞的固定化細(xì)胞顆粒，經(jīng)過濾、淋洗后作為生物催化劑。

6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述分離純化方法如下：將應(yīng)液在45～95℃下減壓蒸餾，收集45～55℃餾分即為產(chǎn)物(S)-環(huán)氧氯丙烷，收集85～95℃餾分為副產(chǎn)物(R)-3-氯-1，2-丙二醇。

7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于所述副產(chǎn)物經(jīng)后處理循環(huán)使用，所述后處理方法如下：將(R)-3-氯-1，2-丙二醇與有機(jī)酸溶液按摩爾比1∶0.1～0.5混合，通入干燥的氯化氫氣體，在100～130℃下鹵化反應(yīng)10～20h，得到(R，S)-1，3-二氯-2-丙醇和(R，S)-2，3-二氯丙醇混合物，將混合物與pH?8.0～10.0的堿溶液按摩爾比0.5～0.8∶1混合，在55～75℃下反應(yīng)5～20分鐘，得到(R，S)-環(huán)氧氯丙烷，回收用于循環(huán)制備(S)-環(huán)氧氯丙烷；所述有機(jī)酸溶液為下列之一：醋酸、乳酸、甲苯磺酸或草酸；所述堿溶液為下列之一：氫氧化鈉水溶液、氫氧化鉀水溶液或碳酸鈉水溶液。

8.黑曲霉(Aspergillus?niger)ZJB-09173，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址：中國，武漢，武漢大學(xué)，430072，保藏編號：CCTCC?NO：M?2010275，保藏日期：2010年10月24日。