[發明專利]一株新型廣譜抗臨床和植物致病真菌的芽孢桿菌及其應用

無效

• 申請號: 201110349266.3
• 申請日: 2011-11-08
• 公開（公告）號: CN103087939A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: 金敏;李君文;陳娜;邱志剛;諶志強;陳照立;王新為
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院衛生學環境醫學研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P1/04;C12R1/07
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及一種新型廣譜抑制臨床和植物致病真菌的細菌菌株Bacillus?sp.AH-E-1及其應用。更具體地說，是涉及一種具有廣譜抗真菌功能的新型生防細菌和益生菌。

背景技術

人類真菌感染一般分為兩大類：淺部真菌感染和深部真菌感染。淺部真菌感染通常是由各種皮膚癬菌引起，主要侵犯皮膚、毛發、指甲等；而深部感染通常由白色念珠菌、新生隱球菌、粗球孢子菌等引起，主要侵犯內臟器官和深部組織，危害性很大，常可危及生命。近年來，隨著廣譜抗菌藥物和免疫抑制藥的大量使用，以及腫瘤化療、器官移植和艾滋病的出現，產生免疫抑制的個體不斷增多，使真菌感染的發病率呈上升趨勢，耐藥現象增多，真菌感染日益引起人們關注。據世界衛生組織(WHO)2004年統計估計，全球每年的系統性真菌感染人數為33.5萬。其中最常見的是系統性念珠菌病，約占所有此類感染的70％左右，而其引起的死亡率又高達40％左右。同樣，真菌病害也一直是危害植物生長、影響作物產量的主要病害，如何有效地防治真菌病害一直是育種學家們努力攻克的難題。

據統計，抗真菌藥物在全球抗感染藥市場中排列第三位，總銷售額約為40億-42億美元，來自輝瑞公司的一份資料顯示，近20年來，深部真菌感染呈持續增多趨勢。面對臨床的迫切需要，抗真菌藥的進步似乎差強人意。目前，臨床上應用的抗真菌藥仍然以化學藥物為主，如氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑、卡泊芬凈、特比萘芬等，而我國真菌感染的廣譜治療依賴于兩性霉素及其脂質體、5-氟胞嘧啶、氟康唑和伊曲康哇。但嚴重的毒性作用如腎臟損害限制了兩性霉素的使用，5-氟胞嘧啶亦存在毒副作用及耐藥問題，氟康唑和伊曲康唑盡管相對安全些，但在應用中亦出現耐藥現象及天然耐藥菌株，另外，氟康唑雖為WHO推薦的深度真菌感染首選用藥，對白色念珠菌和新生隱球菌效果最好，但對克柔念珠菌和光滑念珠菌效果差，對曲菌無效。新研發的卡泊芬凈、米卡芬凈等作用于細胞壁的新型抗生素具有高選擇性、安全性高、耐藥少見等明顯優勢，是念珠菌感染和曲霉感染的首選治療方案，但由于其價格昂貴，專利保護期很長，因此也限制了其在我國臨床中的應用，另外，該藥對隱球菌無效。因此，我國迫切需要研制一種具有自主知識產權的、高效、廣譜、低毒安全的新型抗真菌藥物。

芽胞桿菌是一類好氧、能產芽胞的革蘭氏陽性桿狀細菌，在自然界中分布非常廣泛，生理特性豐富多樣，是土壤和植物微生態的優勢種群。由于它能產生脂肽抗生素、細胞壁降解酶類、細菌素和其它抗菌蛋白及揮發性抗菌物質，對某些植物病原真菌或細菌、甚至某些動物病原菌、病毒、支原體、腫瘤細胞均表現出一定的抑制作用，再加上這類細菌通過發酵可以大規模獲得，產生的芽孢對高熱、極酸、紫外線具有很強的耐受力，因此，近幾年來成為國內外的研究熱點，已報道的能抑制真菌生長的芽孢桿菌主要包括枯草芽孢桿菌(B.subtilis)、蘇云金芽孢桿菌(B.thuriniensis)、蠟狀芽孢桿菌(B.cereus)、短小芽孢桿菌(B.pumilus)、多粘芽孢桿菌(B.polymyxa)、解淀粉芽孢桿菌(B.amyloloquefaci)等。然而，這些芽孢桿菌主要針對植物絲狀致病真菌具有明顯的效果，對于人類淺部真菌和深部真菌病原體，卻未見抗真菌效果研究和報道。

發明內容

本發明的目的是提供一株可以廣譜抑制臨床和植物致病真菌的新型細菌菌株Bacillus?sp.AH-E-1，其分類屬于芽孢桿菌。

本發明的目的是提供制備Bacillus?sp.AH-E-1抗真菌物質的方法，其特征在于：發酵培養基為土豆液體培養基，培養基組成為(g/L)：鮮土豆，500g；葡萄糖，20g；pH自然。

本發明公開了Bacillus?sp.AH-E-1抑制的臨床致病真菌種類，它至少包括以下20種絲狀真菌和酵母菌：黃曲霉、煙曲霉、須癬毛癬菌、裴氏著色真菌、構巢曲霉、黑曲霉、卡氏分枝孢子菌、申克孢子絲菌、緊密著色真菌、紅色毛癬菌、犬小孢子菌、總狀毛霉、雜色曲霉、疣狀著色真菌、熱帶念珠菌、光滑念珠菌、近平滑假絲酵母、克柔念珠菌、近平念珠菌、新生隱珠菌。

本發明公開了Bacillus?sp.AH-E-1抑制的植物致病真菌的種類，它至少包括以下13種絲狀真菌：葡萄球座菌、花生莖點霉、馬爾可夫葉點霉、稻瘟病菌、葡枝根霉、蘋果黑腐皮殼菌、彎孢菌、棉花炭疽、禾谷鐮孢、葡萄座腔菌、辣椒疫霉、茄鏈格孢、禾谷絲核菌。