[發(fā)明專利]從諸葛菜中提取抗菌肽的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110345856.9 | 申請日： | 2011-11-07 |
| 公開（公告）號： | CN102382183A | 公開（公告）日： | 2012-03-21 |
| 發(fā)明（設計）人： | 周麗蓉;陳文清;馮雷 | 申請（專利權(quán)）人： | 四川大學 |
| 主分類號： | C07K14/415 | 分類號： | C07K14/415;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/18;C07K1/16 |
| 代理公司： | 成都立信專利事務所有限公司 51100 | 代理人： | 馮忠亮 |
| 地址： | 610065 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 諸葛 提取 抗菌 方法 | ||
1.從諸葛菜中提取抗菌肽的方法，其特征在于如下步驟：
（1）將諸葛菜研磨成漿，加入可溶蛋白提取緩沖液，在3—5℃浸提、過濾、離心分離濾液，棄沉淀，取上清液；
??（2）將上清液邊攪拌邊加入（NH4）2SO4至飽和度35—45%、3—5℃靜置、離心分離，再得上清液，再加入（NH4）2SO4至飽和度75—85%，靜置，離心分離，將沉淀溶于離子交換層析緩沖液Ⅰ中透析，得到蛋白質(zhì)粗提液；
（3）離子交換層析，將蛋白質(zhì)粗提液上預先用洗脫液平衡好的離子交換層析柱，用離子交換層析緩沖液Ⅰ淋洗至基線，再用離子交換層析緩沖液Ⅱ進行洗脫，檢測抑菌活性收集活性組分；
（4）將上述所得活性組分用離子交換層析緩沖液Ⅰ透析，再用凝膠過濾緩沖液作透析，再抽真空濃縮，將濃縮液上分子篩層析柱，用凝膠過濾緩沖液洗脫，檢測抑菌活性，收集活性組分，將活性組分冷凍干燥得抗菌活性干粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于離子交換層析緩沖液Ⅰ為20mol/L?pH6.2磷酸緩沖液，離子交換層析緩沖液Ⅱ為每升離子交換層析緩沖液Ⅰ中加入1mol?NaCl，洗脫液和凝膠過濾緩沖液為50mol/L?pH7.0磷酸緩沖液加0.1mol/L?NaCl，可溶蛋白提取緩沖液為50mol/L?pH7.0磷酸緩沖液加0.1mol/L?KCl和2mM?EDTA，離子交換層析柱為CM—52；分子篩層析柱為SephadexG—50。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的諸葛菜為其莖和葉。
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