[發(fā)明專利]一種利用廣西金線蓮蒴果快速繁育其種苗的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110343314.8
• 申請(qǐng)日: 2011-11-03
• 公開（公告）號(hào): CN102499088A
• 公開（公告）日: 2012-06-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 付傳明;黃寧珍;何金祥;趙志國(guó);石云平;唐鳳鸞
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西壯族自治區(qū)中國(guó)科學(xué)院廣西植物研究所
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 桂林市華杰專利商標(biāo)事務(wù)所有限責(zé)任公司 45112
• 代理人: 羅玉榮

1.一種利用廣西金線蓮蒴果快速繁育其種苗的方法，包括如下步驟：

（1）蒴果成熟度的選擇：將野外采集的金線蓮植株引種在人工資源圃內(nèi)，于花期選擇優(yōu)良株系進(jìn)行人工授粉和果實(shí)培育，金線蓮蒴果在成熟過程中，內(nèi)部種胚的顏色由乳白色漿狀逐漸轉(zhuǎn)變成金黃色的絲狀，其中以人工授粉后生長(zhǎng)120~150天的未開裂蒴果為最佳材料；

（2）種子的萌發(fā)培養(yǎng)：將選取的蒴果材料經(jīng)外表滅菌處理后，取出內(nèi)部的種胚，均勻的撒播到萌發(fā)培養(yǎng)基上，在溫度24~28℃、光照強(qiáng)度20μmol·m^-2·s^-1、光照時(shí)間12?h/d的條件下，培養(yǎng)25天后，種子萌發(fā)形成原球莖；

（3）原球莖的分化：將播種后形成的原球莖及時(shí)轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基中，在溫度24~28℃、光照強(qiáng)度30?μmol·m^-2·s^-1、光照時(shí)間12?h/d的條件下，培養(yǎng)20~30天，原球莖分化形成帶葉的芽苗；

（4）分化苗的增殖及壯苗培養(yǎng):?將原球莖分化的幼嫩芽苗轉(zhuǎn)入轉(zhuǎn)接到增殖及壯苗培養(yǎng)基里，在溫度24~28℃、光照強(qiáng)度40μmol·m^-2·s^-1、光照時(shí)間12?h/d的條件下，培養(yǎng)約30天可培養(yǎng)出4~6cm高的健壯大苗；

（5）生根培養(yǎng):?經(jīng)已分化的廣西金線蓮芽苗轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上，在溫度24~28℃、光照強(qiáng)度40μmol·m^-2·s^-1、光照時(shí)間12?h/d的條件下，培養(yǎng)約35天可培養(yǎng)出5cm高以上根系發(fā)達(dá)的完整大苗；

（6）馴化及移栽：經(jīng)過生根培養(yǎng)的健壯大苗，待根系生長(zhǎng)發(fā)達(dá)后，便可進(jìn)行出瓶移栽；出瓶前，將試管苗轉(zhuǎn)移到溫室大棚內(nèi)煉苗15~20天，然后將試管苗從瓶中取出，小心地將根部附著的培養(yǎng)基洗凈，待植株表面水分稍干便可種植，腐殖土或塘泥均可作為移栽基質(zhì)，移栽后保持溫度為22~28℃，濕度為75%?~80%，成活率達(dá)到95％以上。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是：步驟（2）中所述萌發(fā)培養(yǎng)基為MS+AC1.0g/L+蔗糖30g/L+瓊脂6.0g/L，pH為5.8。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是：步驟（3）中所述原球莖分化培養(yǎng)基為MS+馬鈴薯汁200g/L?+AC1.0g/L+蔗糖30g/L+瓊脂6.0g/L，pH?5.8。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是：步驟（4）中所述增殖及壯苗培養(yǎng)基為MS+香蕉汁100g/L?+AC1.0g/L+蔗糖30g/L+瓊脂6.0g/L，pH?5.8。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是：步驟（5）中所述生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.5~1.0mg/L+蔗糖20g/L?+瓊脂6.0g/L，pH?5.8。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是：所述消毒是將外植體用在流動(dòng)的自來水下沖洗干凈后，置于超凈工作臺(tái)上用70%的酒精浸泡60s，再用0.1%的HgCl₂消毒8分鐘，取出用無菌水浸洗5次，用無菌濾紙吸干材料表面水分后將蒴果縱向剖開，將里面細(xì)小的種子取出，均勻的灑在培養(yǎng)基的表面。