[發(fā)明專利]一種植物內(nèi)生菌生物轉(zhuǎn)化葡萄干提取物及其制備和在煙草加香中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110342923.1
• 申請日: 2011-11-03
• 公開（公告）號: CN102392050A
• 公開（公告）日: 2012-03-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙國玲;楊華武;劉佳佳;盧紅兵
• 申請（專利權(quán)）人: 湖南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司
• 主分類號: C12P1/02
• 分類號: C12P1/02;A24B3/12;C12N1/14;C12R1/80
• 代理公司: 長沙市融智專利事務(wù)所 43114
• 代理人: 袁靖

1.一種植物內(nèi)生菌生物轉(zhuǎn)化葡萄干提取物的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

(1)植物內(nèi)生菌的培養(yǎng)

將100mLPDB培養(yǎng)基裝于250mL三角瓶中，用接種環(huán)挑植物內(nèi)生菌菌絲接種于三角瓶中，放置于30-37℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-28h使菌種活化，在轉(zhuǎn)速為150r/min下?lián)u瓶培養(yǎng)，得到活化的種子液，所述的植物內(nèi)生菌為青霉屬(Penicillium?sp.)EFCI-24；保藏編號為CCTCC?NO：M2011342；

(2)葡萄干提取物的制備

將挑好、洗凈的葡萄干放入圓底燒瓶中，按葡萄干∶體積百分比濃度為65-75％的酒精＝1∶5.5-6.5的重量比混合，在75-85℃加熱回流萃取2.5-3.5h，提取1-2次，降溫至室溫；過濾，收集濾液；將濾液在溫度45-55℃，真空度不低于0.95Mpa的條件下濃縮，濃縮至溶劑蒸發(fā)一半，得葡萄干提取物，在高壓蒸汽滅菌鍋中115℃下滅菌15-20min；

(3)生物轉(zhuǎn)化葡萄干提取物

將培養(yǎng)好的植物內(nèi)生菌接種到滅菌后的葡萄干提取物中，接種體積比為種子液∶葡萄干提取物＝1∶50-100，置于30-37℃的恒溫振蕩器，轉(zhuǎn)速為150r/min下培養(yǎng)24-28h；

(4)將培養(yǎng)后的葡萄干提取物使用板框過濾，過濾其中的菌種，得到生物轉(zhuǎn)化的葡萄干提取物。

2.一種植物內(nèi)生菌生物轉(zhuǎn)化葡萄干提取物，其特征在于，是由權(quán)利要求1所述的方法制備而成的。

3.權(quán)利要求2所述的植物內(nèi)生菌生物轉(zhuǎn)化葡萄干提取物的應(yīng)用方法，其特征在于，作為煙用香料，添加到香煙中。

4.一種植物內(nèi)生菌，其特征在于，為青霉菌(Penicillium?sp.)EFCI-24。