[發(fā)明專利]提高甜高粱燃料乙醇廢釀酒酵母中S-腺苷-L-甲硫氨酸和超氧化物歧化酶含量的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110338051.1
• 申請日: 2011-10-31
• 公開（公告）號: CN102391998A
• 公開（公告）日: 2012-03-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 凌豐;丁文勇;孫愛君;宋彥霞;岳美琪
• 申請（專利權(quán)）人: 中興能源（天津）有限公司
• 主分類號: C12N9/08
• 分類號: C12N9/08;C12P7/06;C07H19/167;C07H1/08;C12R1/865
• 代理公司: 天津市北洋有限責(zé)任專利代理事務(wù)所 12201
• 代理人: 陸藝

1.提高甜高粱燃料乙醇廢釀酒酵母中S-腺苷-L-甲硫氨酸和超氧化物歧化酶含量的方法，其特征是包括如下步驟：

(1)釀酒酵母和甜高粱莖稈汁經(jīng)20-38小時發(fā)酵生產(chǎn)燃料乙醇后，取出廢釀酒酵母液，經(jīng)3000-5000rpm，離心5-15分鐘，得到濕廢酵母菌體；

(2)按比例取40-60g所述濕廢酵母菌體，20-50g葡萄糖，0.5-4g甲硫氨酸，0.005-0.015g硫酸銅，0.03-0.06g硫酸鋅，加入直接壓榨的新鮮的總糖質(zhì)量含量為13-20％的甜高粱莖稈汁至1L混勻；在pH＝5.0、通空氣量為0.8-1.5vvm、攪拌轉(zhuǎn)速為120-160rpm及溫度為30℃-34℃條件下，活化培養(yǎng)20-40小時，得到活化發(fā)酵液；

(3)將所述活化發(fā)酵液以3000-5000rpm，離心5-15分鐘，棄上清液，得到活化后濕酵母菌體；

(4)取所述活化后濕酵母菌體，加入6-12倍體積的1.5mol/L高氯酸水溶液，冰浴條件下，攪拌破壁1-2小時，3000-5000rpm，離心5-15分鐘，分離得到SAM上清液；

或取所述活化濕酵母菌體，加入8-10倍體積的體積濃度為70-90％的異丙醇水溶液，在冰浴中攪拌1-2小時進(jìn)行破壁，以4000-6000rpm，離心5-15min，棄去上清，得到沉淀；加入2-4倍沉淀質(zhì)量的pH＝7.8，濃度為0.05mol/L的K₂HPO₄-KH₂PO₄緩沖液，攪拌提取1-3個小時，以4000-6000rpm，離心5-15min，得到SOD上清液，所述SAM為S-腺苷-L-甲硫氨酸，所述SOD為超氧化物歧化酶。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高甜高粱燃料乙醇廢釀酒酵母中S-腺苷-L-甲硫氨酸和超氧化物歧化酶含量的方法，其特征是所述步驟(1)為：將甜高粱莖稈經(jīng)24-30小時發(fā)酵生產(chǎn)燃料乙醇后，取出廢釀酒酵母液，經(jīng)4000rpm，離心10分鐘，得到濕廢酵母菌體。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高甜高粱燃料乙醇廢釀酒酵母中S-腺苷-L-甲硫氨酸和超氧化物歧化酶含量的方法，其特征是所述步驟(2)為：按比例取50g所述濕廢酵母菌體，30g葡萄糖，2g甲硫氨酸，0.010g硫酸銅，0.04g硫酸鋅，加入直接壓榨的新鮮的總糖質(zhì)量含量為15％的甜高粱莖稈汁至1L混勻；在pH＝5.0、通空氣量為1.2vvm、攪拌轉(zhuǎn)速為140rpm及32℃活化培養(yǎng)30小時，得到活化發(fā)酵液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高甜高粱燃料乙醇廢釀酒酵母中S-腺苷-L-甲硫氨酸和超氧化物歧化酶含量的方法，其特征是所述步驟(3)為：將所述活化發(fā)酵液以4000rpm，離心10分鐘，棄上清液，得到活化濕酵母菌體。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高甜高粱燃料乙醇廢釀酒酵母中S-腺苷-L-甲硫氨酸和超氧化物歧化酶含量的方法，其特征是所述步驟(4)為：取所述活化濕酵母菌體，加入8倍體積的1.5mol/L高氯酸水溶液，冰浴條件下，攪拌破壁1.5小時，4000rpm，離心10分鐘，分離得到SAM上清液；

或取所述活化濕酵母菌體，加入9倍體積的體積濃度為80％的異丙醇水溶液，在冰浴中攪拌1.5小時進(jìn)行破壁，以5000rpm，離心10min，棄去上清，得到沉淀；加入3倍沉淀質(zhì)量的pH＝7.8，濃度為0.05mol/L的K₂HPO₄-KH₂PO₄緩沖液，攪拌提取2個小時，以5000rpm，離心10min，得到SOD上清液。