[發明專利]一種可直接移栽的鐵皮石斛育苗方法

無效

• 申請號: 201110332813.7
• 申請日: 2011-10-28
• 公開（公告）號: CN102499085A
• 公開（公告）日: 2012-06-20
• 發明（設計）人: 章亞輝;章紀海
• 申請（專利權）人: 樂清市鼎元生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 杭州浙科專利事務所 33213
• 代理人: 吳秉中

技術領域

本發明涉及一種組培方法，尤其是針對鐵皮石斛的組培方法，屬于生物技術領域。?

背景技術

石斛屬植物中有不少是名貴中藥，在《本草綱目》中石斛被列為上品。我國76種石斛屬植物中有近40種作藥用，著名的有金釵石斛、鐵皮石斛、霍山石斛等，具有強陰益精、補腎益力、輕生延年等作用，其藥用與保健功能日益被挖掘，其應用范圍正迅速擴大。同時，石斛屬植物約有四分之一可供觀賞，以花艷麗而著稱，近年作為觀賞植物發展迅速，已形成獨立產業。鑒于集藥用和觀賞于一體的價值，使之過度的采伐利用，加之其本體自然繁殖率低，造成了石斛供需之間的緊張狀況，我國已將其列為瀕于絕滅的受保護的中藥品種之一。?

自1960年法國人Gmorel利用石斛基尖組織培養無病毒植株的無性繁殖技術創立以來，石斛組織培養技術逐步深化，尤其近年來石斛組織培養育苗逐步趨向產業化，石斛組織培養的最佳條件，包括適宜的光照、溫度、濕度、pH以及如何選用外植體，如何配置營養適宜的培養液等都取得長足進展。但是通過傳統的石斛組培方法，特別是鐵皮石斛組培方法培育出來的苗種由于還不夠壯實，生命力較弱，因此在移栽到自然環境中前都需要在大棚內進行3-5個月的訓化（煉苗），而且其移栽后的生長周期較長，造成育苗成本較高。??????

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種組培苗無需訓化，而可直接移栽的鐵皮石斛組培方法，提高了鐵皮石斛組培苗的擴繁速度、生產質量、移栽成活率，并縮短了移栽后鐵皮石斛的生長周期，提升了成年石斛的質量。?

為解決上述問題，本發明的鐵皮石斛育苗方法包括下列步驟：?

1）將鐵皮石斛的蒴果種子經消毒后，播入專用培養基Ⅰ+專用組培杯+專用培養室里，進行萌發培養，培養溫度為24-26℃，濕度為65-75%，光照度為1000-2000lx，光照時間為10-12小時/日，培養45-60天，外植體萌芽形成綠色的原球莖；

2）將原球莖轉入專用培養基Ⅱ+專用組培杯+專用培養室里，進行原球莖增殖、分化培養，培養溫度為22-28℃，濕度為65-75%，光照度為1500-2500lx，光照時間為10-12小時/日，培養60天，由原球莖培育成1-2CM小苗，同時伴隨著有部分新原球莖產生，再將小苗轉入同樣的組培杯、培養基和環境下繼續培養1個月,將小苗培養成中苗，苗高為3-4cm；

3）將中苗轉入專用培養基Ⅲ+專用組培杯+專用培養室里，培養溫度為20-30℃，濕度為65-75%，光照度為2000-4000lx，光照時間為10-12小時/日，培養60天，由小苗培育成高為5-9CM，莖粗為?0.4-0.5CM的壯苗；

所述專用培養基Ⅰ包括1/2MS基本培養基+芋頭汁15-25%(V/V)+瓊脂4-6g/L，PH值為5.2-5.8；

所述專用培養基Ⅱ包括MS基本培養基+?BA(6-卞氨基腺嘌呤)0.1-0.2mg/L+瓊脂4-6g/L+土豆汁6-10%(V/V)+香蕉汁10-14%(V/V)，?PH值為5.4-5.8；

所述專用培養基Ⅲ包括MS基本培養基+?NAA?(α-萘乙酸)0.1-0.2mg/L+香蕉汁8-10%(V/V)+土豆汁5-7%(V/V)?+芋頭汁8-12%(V/V)?+瓊脂4-6g/L，PH值為5.4-5.8；

所述專用組培杯為具有適度空間容積的透明的塑料杯體，所述塑料杯體杯口通過透明的塑料膜塑封，所述塑料膜上設置濾膜；

所述專用培養室為滅菌培養室，所述滅菌室采用自然光照，其頂端設置采光瓦和遮陽網，并設有溫度濕度調節設備。

本發明的進一步優化方案，其特征在于所述塑料杯體為圓柱形，杯口直徑為9-10cm,?杯底直徑為5-6cm,杯高為9-10cm，壁厚0.15-0.25mm。?

所述的組培苗可直接移栽的鐵皮石斛組培方法，其特征在于所述專用培養基Ⅰ包括1/2MS基本培養基+芋頭汁20%(V/V)+瓊脂5g/L，PH值為5.5。?

所述的組培苗可直接移栽的鐵皮石斛組培方法，其特征在于所述專用培養基Ⅱ包括MS基本培養基+?BA(6-卞氨基腺嘌呤)0.15mg/L+瓊脂5g/L+土豆汁8%(V/V)+香蕉汁12%(V/V)，?PH值為5.5。?

所述的組培苗可直接移栽的鐵皮石斛組培方法，其特征在于所述專用培養基Ⅲ包括MS基本培養基+?NAA?(α-萘乙酸)0.15mg/L+香蕉汁9%(V/V)+土豆汁6%(V/V)?+芋頭汁10%(V/V)?+瓊脂5g/L，PH值為5.5。?