[發(fā)明專利]豬繁殖與呼吸綜合征、豬瘟、偽狂犬病的三聯(lián)活疫苗及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110331159.8
• 申請日: 2011-10-27
• 公開（公告）號: CN102727882A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發(fā)明（設計）人: 武華
• 申請（專利權）人: 華威特(北京)生物科技有限公司
• 主分類號: A61K39/245
• 分類號: A61K39/245;A61K39/187;A61K39/12;A61P31/14;A61P31/22
• 代理公司: 北京萬慧達知識產權代理有限公司 11111
• 代理人: 楊穎;張一軍

1.一種疫苗組合物，含有豬繁殖與呼吸綜合征疫苗，豬瘟疫苗及偽狂犬病疫苗。

2.根據(jù)權利要求1所述的疫苗組合物，其特征在于，所述的豬繁殖與呼吸綜合征病毒疫苗，豬瘟疫苗及偽狂犬病疫苗之間無免疫抑制。

3.根據(jù)權利要求2所述的疫苗組合物，其中所述豬繁殖與呼吸綜合征病毒疫苗、所述豬瘟疫苗及所述偽狂犬病疫苗的TCID50值的比例為1∶4∶1。

4.根據(jù)權利要求2所述的疫苗組合物，其中所述豬繁殖與呼吸綜合征病毒疫苗含有Nsp1核苷酸序列，所述序列的編碼序列與SEQ?ID?NO：1具有至少90％的同源性。

5.根據(jù)權利要求4所述的疫苗組合物，其中所述豬繁殖與呼吸綜合征病毒疫苗進一步含有Nsp2核苷酸序列，所述Nsp2核苷酸的編碼序列與SEQ?ID?NO：2具有至少90％的同源性。

6.根據(jù)權利要求5所述的疫苗組合物，其中所述豬繁殖與呼吸綜合征病毒疫苗含有由SEQ?ID?NO：1編碼的Nsp1核苷酸序列，且含有由SEQ?ID?NO：2編碼的Nsp2核苷酸序列。

7.根據(jù)權利要求2所述的疫苗組合物，其中所述豬繁殖與呼吸綜合征病毒疫苗含有豬繁殖與呼吸綜合征病毒的核苷酸序列，該序列的編碼序列與SEQ?ID?NO：3具有至少90％的同源性。

8.根據(jù)權利要求7所述的疫苗組合物，其中所述豬繁殖與呼吸綜合征病毒疫苗含有豬繁殖與呼吸綜合征病毒的核苷酸序列，該序列由SEQ?ID?NO：3編碼。

9.根據(jù)權利要求1-8任一所述的疫苗組合物，其中所述豬瘟疫苗的編碼序列與SEQ?ID?NO：9具有至少80％的同源性。

10.根據(jù)權利要求9所述的疫苗組合物，其中所述豬瘟疫苗的編碼序列如SEQ?ID?NO：9所示。

11.根據(jù)權利要求1-10任一所述的疫苗組合物，其中所述偽狂犬病疫苗編碼序列與NCBI參考號NC_006151的核苷酸序列至少具有80％的同源性。

12.根據(jù)權利要求11所述的疫苗組合物，其中所述偽狂犬病疫苗編碼序列如NCBI參考號NC_006151的核苷酸序列所示。

13.根據(jù)權利要求1或2所述的疫苗組合物，其進一步含有佐劑。

14.根據(jù)權利要求1或2所述的疫苗組合物，其進一步含有穩(wěn)定劑。

15.根據(jù)權利要求14所述的疫苗組合物，其中所述穩(wěn)定劑包括蔗糖、L-谷氨酸鈉、或水解乳蛋白。

16.一種制備權利要求1或2所述的疫苗組合物的方法，包括：

(1)將細胞系進行傳代和培養(yǎng)；

(2)將豬繁殖與呼吸綜合征病毒疫苗、豬瘟疫苗及偽狂犬病疫苗分別接種易感細胞，用維持液培養(yǎng)，制備生產種毒；

(3)將所制備的生產種毒分別接種長滿90-100％細胞的介質上，用維持液培養(yǎng)增殖得到豬繁殖與呼吸綜合征病毒疫苗抗原液、豬瘟疫苗抗原液及偽狂犬病疫苗抗原液；

(4)將豬繁殖與呼吸綜合征病毒疫苗抗原液、豬瘟疫苗抗原液及偽狂犬病疫苗抗原液與穩(wěn)定劑充分混合。

17.按照權利要求16所述的方法，其特征在于：步驟(1)、(2)、(3)中所述的用于生長豬繁殖與呼吸綜合征病毒疫苗的細胞為Marc-145細胞系、MA-104細胞系、Vero細胞系、DL-2621細胞系等傳代細胞系或PAM細胞等原代細胞。

18.按照權利要求16所述的方法，其特征在于：步驟(1)、(2)、(3)中所述的用于生長豬瘟疫苗的細胞為BT細胞系、Vero細胞系、MPK細胞系、SK6細胞系、PK2a細胞系、CPK細胞系、RKC細胞系、MDBK細胞系、MDCK細胞系、CRFK細胞系、PT細胞系和ST細胞系等傳代細胞系或BT細胞等原代細胞。

19.按照權利要求16所述的方法，其特征在于：步驟(1)、(2)、(3)中所述的用于生長偽狂犬疫苗的細胞為Marc-145細胞系、MDBK細胞系、BT細胞系。