[發明專利]一種高產過氧化氫酶的重組枯草芽孢桿菌及其構建方法和應用有效
| 申請號: | 201110328753.1 | 申請日: | 2011-10-26 |
| 公開(公告)號: | CN102382790B | 公開(公告)日: | 2018-02-23 |
| 發明(設計)人: | 陳堅;郭婭瓊;堵國成;周景文;康振 | 申請(專利權)人: | 江南大學 |
| 主分類號: | C12N1/21 | 分類號: | C12N1/21;C12N15/75;C12N9/08;C12R1/125 |
| 代理公司: | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司23211 | 代理人: | 張勇 |
| 地址: | 214122 江*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 高產 過氧化氫酶 重組 枯草 芽孢 桿菌 及其 構建 方法 應用 | ||
1.一種高產過氧化氫酶的重組枯草芽孢桿菌,其特征在于,所述重組枯草芽孢桿菌含有克隆有過氧化氫酶基因的質粒pSTOP1622-katA,所述過氧化氫酶基因克隆于pSTOP1622質粒木糖啟動子下游,所述katA基因來源于枯草芽孢桿菌B.subtilis WSHDZ-01;所述過氧化氫酶基因含有編碼自身信號肽和啟動子的序列,擴增來源于枯草芽孢桿菌B.subtilis WSHDZ-01的katA基因的引物對為:
katA primer1:5'-GGACTAGTAAAAGCTGTTACAACAAGTT-3'
katA primer2:5'-TCCCCCCGGGGATGAGAAGCATACGCAATG-3'。
2.權利要求1所述重組枯草芽孢桿菌的構建方法,其特征在于包括如下步驟:
(1)構建木糖誘導型表達質粒pSTOP1622-katA,所述katA基因來源于枯草芽孢桿菌B.subtilis WSHDZ-01;
(2)將步驟(1)獲得的木糖誘導型表達質粒轉化枯草芽孢桿菌。
3.根據權利要求2所述的構建方法,其特征是:所述pSTOP1622-katA由katA片段插入到質粒pSTOP1622中的SpeI與SmaI限制性酶切位點之間構建而成。
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