[發(fā)明專利]一種光合細(xì)菌絮凝劑的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110326861.5
• 申請(qǐng)日: 2011-10-25
• 公開（公告）號(hào): CN102363793A
• 公開（公告）日: 2012-02-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 荊政;鄭展望;何歡;蘇玉剛;周曉云
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 杭州江南科學(xué)研究院有限公司
• 主分類號(hào): C12P1/04
• 分類號(hào): C12P1/04;C12R1/01
• 代理公司: 杭州裕陽專利事務(wù)所(普通合伙) 33221
• 代理人: 應(yīng)圣義

1.一種光合細(xì)菌絮凝劑的制備方法，其特征在于，具體方法如下：

選用沼澤紅假單胞菌(Rhodop?seudanonas?palustris)為出發(fā)菌株，菌種保藏編號(hào):CGMCC1.2181，保藏地點(diǎn)：中國普通微生物菌種保藏管理中心；

a、配制培養(yǎng)基：

1)菌種保藏培養(yǎng)基：(NH₄)₂SO₄?1g，MgSO₄﹒7H₂O?0.2g，NaHCO₃?5g，K₂HPO₄?0.5g，NaCl?0.2g，蛋白胨1.5g，蒸餾水加至1L，瓊脂15.0g，pH7.0；10⁵Pa滅菌15min；

2)種子培養(yǎng)基：KH₂PO_$?0.5-5%，CaCl₂?0.01-0.5%，乙酸鈉0.2-2.0%，葡萄糖0.1-1.0%，蛋白胨0.1-1.5%，MnCl﹒4H₂O?0.1-1.0，蒸餾水加至1L，pH6.8，10⁵(Pa)滅菌15-20min；

3)發(fā)酵培養(yǎng)基：KH₂PO_$?0.5-5%，CaCl₂?0.01-0.5%，乙酸鈉0.2-2.0%，葡萄糖1-10%，蛋白胨0.5-5%，蒸餾水加至1L,pH6.8，10⁵Pa滅菌15-20min；

b、微生物的培養(yǎng)和發(fā)酵條件：

所述1)?菌種保藏培養(yǎng)基培養(yǎng)條件和保藏方法：在試管中加入未滅菌的培養(yǎng)基，約占試管的總量的1/3，滅菌后試管垂直放置在試管架上，冷卻后放置一周，確認(rèn)為無菌后，在無菌室中穿刺接入培養(yǎng)好的菌種，在30⁰C和光照下培養(yǎng)2-4周，光照箱內(nèi)，以40瓦的電燈對(duì)稱照射，光照強(qiáng)度以1000勒克司左右為佳，培養(yǎng)成熟的標(biāo)志是穿刺針周圍產(chǎn)生紅色菌落,?培養(yǎng)成熟后的固體培養(yǎng)基以滅菌的礦物油在無菌室中加入試管中,?礦物油高于培養(yǎng)基1cm，放在4⁰C冰箱中保存；

所述2)種子培養(yǎng)基培養(yǎng)條件:?種子培養(yǎng)基在滅菌后接入保藏培養(yǎng)基菌種,?在25⁰C-35⁰C通氣培養(yǎng)15-40h，通氣比為1:0.5-2.0；

所述3)發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵條件：發(fā)酵培養(yǎng)基在滅菌后接入5-15%種子培養(yǎng)基的菌種，在25⁰C-35⁰C通氣培養(yǎng)15-40h，通氣比為1:0.5-2.0；

c、絮凝劑的提取：

培養(yǎng)成熟后的發(fā)酵液，以高速離心機(jī)在5000-10000r/min離心分離20-40min，分別收集清液和菌體，所述清液作為絮凝劑的制備液體；

收集上述清液，加入1-3倍的無水乙醇，混合均勻后，在容器中靜止8-10h，收集沉淀物，沉淀物再以4000-8000r/min離心分離20-40min，收集固體；

d、絮凝劑成品制備：

上述固體真空干燥，獲得絮凝劑白色固體粉末成品，真空干燥的溫度：60⁰C±2⁰C，真空度0.06MPa。