[發(fā)明專利]戊型肝炎病毒抗原的制備方法及其產(chǎn)品

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110326748.7
• 申請(qǐng)日: 2011-10-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102392049A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-03-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張志芳;柳紀(jì)省;李軼女;易詠竹;蘭喜;楊標(biāo);王金輝;邊大勇;李志勇;吳潤(rùn);王國(guó)增;沈桂芳;舒惠國(guó)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所;中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所
• 主分類號(hào): C12N15/866
• 分類號(hào): C12N15/866;C07K14/08;A61K39/29;A61P31/14;C12N15/51;C12Q1/70;C12Q1/68;A61K48/00;C12R1/93
• 代理公司: 北京市德權(quán)律師事務(wù)所 11302
• 代理人: 余光軍

1.一種制備戊型肝炎病毒抗原的方法，其特征在于，包括：將戊型肝炎病毒抗原基因或優(yōu)化后的戊型肝炎病毒抗原基因分別克隆到桿狀病毒運(yùn)載載體中，構(gòu)建得到重組桿狀病毒轉(zhuǎn)移表達(dá)載體；將所構(gòu)建的重組桿狀病毒轉(zhuǎn)移表達(dá)載體與桿狀病毒DNA進(jìn)行共轉(zhuǎn)染，將戊型肝炎病毒抗原基因或優(yōu)化后的戊型肝炎病毒抗原基因分別轉(zhuǎn)移到桿狀病毒的基因組上獲得重組桿狀病毒；用重組桿狀病毒感染昆蟲宿主或昆蟲細(xì)胞；培養(yǎng)被感染的昆蟲宿主或昆蟲細(xì)胞誘導(dǎo)重組戊型肝炎病毒抗原表達(dá)；收獲并純化所表達(dá)的重組戊型肝炎病毒抗原，即得。

2.按照權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的戊型肝炎病毒抗原基因?yàn)槲煨透窝撞《究找職さ鞍譕RF2基因，其核苷酸序列為SEQ?ID?NO:1所示；所述優(yōu)化后的戊型肝炎病毒抗原基因的核苷酸序列為SEQ?ID?NO:3所示。

3.按照權(quán)利要求1的方法，其特征在于：所述的桿狀病毒運(yùn)載載體選自pBM034,?pBM93,?AcRP23-lacZ,?AcRP6-SC,?AcUWl-lacZ,?BacPAK6,?Bac?to?Pac,?Bacmid,?BlucBacII(pETL),?p2Bac,?p2Blue,?p89B310,?pAc360，pAc373,?pAcAB3，pAcAB?4，PAcAS3,?pAcC129，pAcC4，DZI,?pAcGP67,?pAcIEl,?pAcJPl,?pAcMLF2，pAcMLF?7，pAcMLF8,?pAcMPl，pAcMP2,?pAcRP23，pAcRP25,?pAcRW4,?pAcsMAG,?pAcUWl，pAcUW21，pAcUW2A，pAcUW2B，pAcUW3，pAcUW31，pAcUW41，pAcUW42，pAcUW43，pAcUW51,?pAcVC2，pAcVC3,?pAcYMl,?pAcJcC5,?pBacl，pBac2,?pBlueBacIII,?pBlueBacHis,?pEV55，mXIV,?pIEINeo,?pJVETL,?pJVNhel,?pJVP10,?pJVrsMAG,?pMBac,?pP10,?pPAKl,?pPBac,?pSHONEX?1.1,?pSYN?XIV?VI+,?pSYNVI+wp,??pSYNXIV?VI-,?pVL1391，pVL?1392，pVL?1393，pVL941，pVL?945，pVL?985,?pVTBac,?pBM030或pUAC-5。

4.?按照權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述的桿狀病毒選自BmNPV，AcMNPV，ApNPV，HaNPV，HzNPV，LdMNPV，MbMNPV，OpMNPV，SlMNPV，SeMNPV或SpltNPV；優(yōu)選的，所述桿狀病毒為家蠶桿狀病毒親本株Bm-NPV-ZJ8。

5.?按照權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：將所構(gòu)建的重組桿狀病毒轉(zhuǎn)移表達(dá)載體與家蠶桿狀病毒親本株Bm-NPV-ZJ8?DNA進(jìn)行共轉(zhuǎn)染，通過(guò)體內(nèi)重組將戊型肝炎病毒空衣殼蛋白ORF2基因或優(yōu)化后的戊型肝炎病毒空衣殼蛋白ORF2基因分別轉(zhuǎn)移到家蠶桿狀病毒親本株Bm-NPV-ZJ8的基因組上，替代基因組上的Polyhedrin基因，獲得重組桿狀病毒rBmNPV（HEV-ORF2）或rBmNPV（HEV-ORF2-N）。