[發明專利]一株防治煙草炭疽病的枯草芽孢桿菌

有效

• 申請號: 201110325997.4
• 申請日: 2011-10-24
• 公開（公告）號: CN102367429A
• 公開（公告）日: 2012-03-07
• 發明（設計）人: 孫劍萍;孫宏偉;郭兆奎;王春艷;虞艷芳;元野;賀國強
• 申請（專利權）人: 中國煙草總公司黑龍江省公司牡丹江煙草科學研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/125
• 代理公司: 北京正理專利代理有限公司 11257
• 代理人: 張文祎

技術領域

本發明涉及一株防治煙草炭疽病的枯草芽孢桿菌，屬于微生物領域。

背景技術

煙草炭疽病是煙草主要病害之一，在煙草各生育期都可以發生，以苗期為害最重。我國各產煙區均有發生，塑料大棚育苗管理不善，消毒不徹底、溫濕度不協高，往往在3-4天之內就會發病，造成煙苗生長緩慢甚至大量死亡，造成苗源缺乏，影響后期的煙葉生產。

該病害目前的防治方法主要以化學農藥為主，?但長期使用化學農藥，易使病菌產生抗藥性，危害更加猖獗；同時也會造成煙葉農藥殘留的增加和污染環境等問題，因此與環境相容的生物農藥研制與開發應用，是緩解和改變化學農藥所導致“三R”(Residue，Resistance，Resurgence)問題的有利措施，是促進煙草行業可持續健康發展的重要手段。

發明內容

本發明要解決的第一個技術問題是提供一株無公害且對煙草炭疽病具有顯著防效的枯草芽孢桿菌。

本發明要解決的第二個技術問題是提供一種防治煙草炭疽病的菌劑。

本發明要解決的第三個技術問題是提供一種防治煙草炭疽病菌劑的制備方法。

本發明要解決的第四個技術問題是提供一種防治煙草炭疽病的枯草芽孢桿菌及其菌劑的應用。

為解決上述技術問題，本發明采用如下技術方案：

本發明提供一株枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis），命名為MKT-01，經鑒定為枯草芽孢桿菌枯草亞種（Bacillus?subtilis?subsp.?subtilis），是從煙草根際分離得到，已于2011年7月18日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（簡稱CGMCC，地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編100101），其保藏編號為?CGMCC?No.5082。

本發明還提供一種由保藏編號為CGMCC?No.5082的枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）MKT-01制備的菌劑。該菌劑的優選使用濃度為18.0×10⁸cfu/mL。該菌劑可以通過現有技術中的制備方法來制備，還可以根據需要，添加可接受的輔料，制成各種類型的菌劑。

為了更加詳細地說明本發明所述菌劑的制備，本發明提供了一種所述枯草芽孢桿菌菌劑的優選的制備方法，該方法包括以下步驟：

（1）菌種活化：將保藏號為CGMCC?No.5082的枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）MKT-01接種于斜面培養基上，于26℃~28℃條件下培養2~3天；

（2）種子培養：從斜面培養基上挑取單菌落接入種子培養基中，于26℃~28℃條件下培養18~24小時，制得種子液；

（3）發酵培養：按4~5%的接菌量，將所述種子液接入發酵培養基中，于26℃~28℃條件下培養2~3天，即得所述的枯草芽孢桿菌的菌劑。

上述方法中涉及的各種培養基均可以是現有技術中適于枯草芽孢桿菌生長的培養基。本發明也提供一種優選的培養基配方，即：

所述斜面培養基組分及配比為：蛋白胨10g，酵母粉5g，氯化鈉10?g，瓊脂20?g，加水定容至1000?mL，pH為7.0~7.5，121?℃下高溫蒸汽滅菌30?min。

所述種子培養基和發酵培養基組分及配比為：蛋白胨10g，酵母粉5g，氯化鈉10?g，加水定容至1000?mL，pH為7.0~7.5，121?℃下高溫蒸汽滅菌30?min。

本發明還提供了所述枯草芽孢桿菌MKT-01或所述菌劑在制備防治煙草炭疽病藥物中的應用。

本發明的優點是：

經過試驗證明，本發明所述的枯草芽孢桿菌MKT-01對煙草炭疽病的防治效果高達79.22%，顯著高于目前防治煙草炭疽病的當家生物農藥多抗霉素，與化學農藥代森錳鋅殺菌劑的防治效果持平，因此MKT-01的推廣應用有望代替化學農藥防治煙草炭疽病，保護了環境、降低了農殘，提高了煙葉安全性，具有良好的生物農藥開發前景。

附圖說明

圖1為本發明菌株MKT-01的電鏡照片，桿狀，周生鞭毛；

圖2本發明菌株MKT-01對煙草炭疽病的室內抑菌照片。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明做進一步說明，但并不是限定本發明。下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規方法。下述實施例中所用的試驗材料，如無特殊說明，均為常規生化試劑供應商購買得到。

實施例1?枯草芽孢桿菌MKT-01獲得與鑒定