[發明專利]利用植物激素和鐵離子誘導小球藻合成蝦青素的方法

有效

• 申請號: 201110321005.0
• 申請日: 2011-10-14
• 公開（公告）號: CN103045709A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發明（設計）人: 王艷;秦松
• 申請（專利權）人: 中國科學院煙臺海岸帶研究所
• 主分類號: C12P23/00
• 分類號: C12P23/00;C12R1/89
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 周秀梅;李穎

1.一種利用植物激素和鐵離子誘導小球藻合成蝦青素的方法，其特征在于：

(1)活化培養：將小球藻(Chlorella?zofingiensis)在液體培養基中活化培養，獲得同步化生長的藻液，待用；

(2)誘導培養：取步驟(1)中生長到處于指數生長期的藻液，并向藻液中添加植物激素和鐵離子，同時補充碳源和氮源進行培養，直至藻體細胞內蝦青素的積累量最高時培養結束(取樣采用液相色譜法測定蝦青素積累量)，采收細胞破壁提取蝦青素。

2.按權利要求1所述的利用植物激素和鐵離子誘導小球藻合成蝦青素的方法，其特征在于：所述活化培養是將小球藻(C.zofingiensis)培養于液體培養基中振蕩發酵養，培養條件為溫度20-30℃，光強0-200μmol?m^-2s^-1，轉速100-200rpm，光暗比為12-24h/12-24h。

3.按權利要求1或2所述的利用植物激素和鐵離子誘導小球藻合成蝦青素的方法，其特征在于：所述液體培養基為Kuhl、BG-11、BBM、Basal、CZ-M1、KM1中的一種。

4.按權利要求3所述的利用植物激素和鐵離子誘導小球藻合成蝦青素的方法，其特征在于：所述Kuhl培養基為：10g/L葡萄糖、1g/L硝酸鉀、89mg/L十二水磷酸氫二鈉、621mg/L二水磷酸二氫鈉、246mg/L七水硫酸鎂、9.3mg/L?EDTA、6.9mg/L七水硫酸亞鐵、14.7mg/L二水氯化鈣、0.29mg/L七水硫酸鋅、0.17mg/L一水硫酸錳、0.06mg/L硼酸、0.002mg/L五水硫酸銅、0.012mg/L四水鉬酸銨、1000ml水，pH?6.5。

5.按權利要求3所述的利用植物激素和鐵離子誘導小球藻合成蝦青素的方法，其特征在于：所述誘導培養為取步驟(1)中生長到處于指數生長期的藻液，并向藻液中添加植物激素和鐵離子，同時補充碳源和氮源進行振蕩發酵養培養，培養條件為溫度20-30□C，光強0-200μmol?m^-2s^-1，轉速100-200rpm，光暗比為12-24h/12-24h；直至藻體細胞內蝦青素的積累量最高時培養結束(取樣采用液相色譜法測定蝦青素積累量)，采收細胞破壁提取蝦青素。

6.按權利要求1或5所述的利用植物激素和鐵離子誘導小球藻合成蝦青素的方法，其特征在于：所述植物激素為茉莉酸甲酯、茉莉酸、油菜素內酯中的一種或幾種；并且其一次性添加或流加，流加量控制在0.1-1.0mM。

7.按權利要求1或5所述的利用植物激素和鐵離子誘導小球藻合成蝦青素的方法，其特征在于：所述鐵離子為亞鐵或三價鐵；并且其一次性添加或流加，流加量控制在0.02-20mM。

8.按權利要求1或5所述的利用植物激素和鐵離子誘導小球藻合成蝦青素的方法，其特征在于：所述碳源為無機碳源和/或有機碳源；所述氮源為無機氮源和/或有機氮源；并且其一次性添加或流加，碳源和氮源添加量控制在C/N比100-300。

9.按權利要求7所述的利用植物激素和鐵離子誘導小球藻合成蝦青素的方法，其特征在于：所述無機碳源為二氧化碳、碳酸鹽、碳酸氫鹽中的一種或幾種；所述有機碳源為葡萄糖、蔗糖、果糖、甘油、乙醇、醋酸鹽中的一種或幾種。

10.按權利要求7所述的利用植物激素和鐵離子誘導小球藻合成蝦青素的方法，其特征在于：所述無機氮源為硝酸鹽、銨鹽、氨水中的一種或幾種；所述有機氮源為尿素、酵母粉、蛋白胨中的一種或幾種。